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ELISA檢測概述
ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱：小鼠Apelin小鼠12蛋白(AP12)ELISA試劑盒步驟
英文名稱：Mouse Apelin 12(AP12)ELISA Kit
貨號：PM105837
規(guī)格：96T/48T
保存；2-8℃。
檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔(dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水?。?br>
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果，酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
四環(huán)素檢定瓊脂/Tetracyline Examination Agar副溶血性弧的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
大鼠卵巢顆粒細胞完全培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes
SDS-PAGE Loading Buffer (非還原，5x)10ml國產(chǎn)
薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri香菇 Lentinula edodes
RK1(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2gersion
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞)5×106cells/瓶×2
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞（未分化）苜蓿中華根瘤
單核細胞趨化蛋白4(MCP4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Monocyte Chemotactic Protein 4 (MCP4)
糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis
小鼠畸胎瘤細胞英文名稱：P19
PK-15(豬腎細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠Apelin小鼠12蛋白(AP12)ELISA試劑盒步驟2 ug pET-30 Ek/LIC pET-30 Ek/LIC 低溫運輸，-20℃保存人 VEGFA 轉(zhuǎn)錄變體4 基因全長ORF克隆
2 ug pET-30 Xa/LIC pET-30 Xa/LIC 低溫運輸，-20℃保存人 NMNAT2 基因全長ORF克隆
2 ug pET-30a(+) pET-30a(+) 低溫運輸，-20℃保存人 MITF 基因全長ORF克隆
2 ug pET-31b(+) pET-31b(+) 低溫運輸，-20℃保存人 FAP 基因全長ORF克隆
2 ug pET-32 Ek/LIC pET-32 Ek/LIC 低溫運輸，-20℃保存人 CHST11 基因全長ORF克隆
2 ug pAAV-hrGFP pAAV-hrGFP 低溫運輸，-20℃保存人 SGPL1 基因全長ORF克隆
2 ug pET-32 Xa/LIC pET-32 Xa/LIC 低溫運輸，-20℃保存人 BMX 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆
2 ug pET-32a(+) pET-32a(+) 低溫運輸，-20℃保存人 AHSA1 基因全長ORF克隆
2 ug pET-33b(+) pET-33b(+) 低溫運輸，-20℃保存人 GAL 基因全長ORF克隆
2 ug pET-35b(+) pET-35b(+) 低溫運輸，-20℃保存人 BRIX1 基因全長ORF克隆
公司產(chǎn)品優(yōu)勢：
1，全：公司提供上萬種產(chǎn)品，涵蓋了生物試劑，elisa試劑盒，標準品，培養(yǎng)基，原裝耗材等，基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
2，新：產(chǎn)品更新速度較快，基本上每周都有新產(chǎn)品出現(xiàn)。
3，優(yōu)：產(chǎn)品質(zhì)量好，零投訴。
4，品牌多：公司代理的試劑品牌：Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等進口品牌，國產(chǎn)品牌我們價格更優(yōu)，我們供應(yīng)優(yōu)級純，分析純，化學(xué)純，試劑級，基準試劑，實驗純，教學(xué)試劑，高純試劑，色譜純，光譜純，電子純等試劑級別（可根據(jù)客戶需求定制）。
5，售后：我公司具有上等的技術(shù)團隊，產(chǎn)品一旦售出，產(chǎn)品僅用于科研實驗過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時沒有任何的后顧之憂。