ELISA檢測(cè)概述
      ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠質(zhì)膜鈣ATP酶(PMCA)ELISA試劑盒步驟
英文名稱(chēng)：Rat Plasma membrane calcium-transporting ATPase 2,PMCA Elisa kit
貨號(hào)：PR105949
規(guī)格：96T/48T 
保存；2-8℃。
檢測(cè)目的：用于檢測(cè)血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、等動(dòng)植物。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶(hù)提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周?chē)着c中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。

大鼠卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

菊糖芽胞桿 Sporolactobacillus inulinus粘紅酵母膠粘變種 Rhodotorula glutinis var. glutinis

胰蛋白示/示蛋白胨/月示蛋白胨/月示胨/蛋白示/TryptoseBR250/500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus

MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

OF發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae酒假絲酵母 Candida kefyr

RWPE1(前列腺上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

洋蔥假單胞 Pseudomonas cepacia釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

Calu-3(肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

巴固氮螺 Azospirillum brasilense

大鼠質(zhì)膜鈣ATP酶(PMCA)ELISA試劑盒步驟100mL CHES Buffer,0.5M,pH9.0   CHES Buffer,0.5M,pH9.0   常溫保存人 MAPK14 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100mL CHES Buffer,0.5M,pH9.5   CHES Buffer,0.5M,pH9.5   常溫保存人 EIF2AK2 / PKR 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH2.5   Citrate Buffer,0.5M,pH2.5   常溫保存人 GPC5 / glypican 5 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH3.0   Citrate Buffer,0.5M,pH3.0   常溫保存人 Caspase-8 / ALPS2B 轉(zhuǎn)錄變體B 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH3.5   Citrate Buffer,0.5M,pH3.5   常溫保存人 interleukin 27 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH4.0   Citrate Buffer,0.5M,pH4.0   常溫保存人 FOS 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH4.5   Citrate Buffer,0.5M,pH4.5   常溫保存人 CREB1 轉(zhuǎn)錄變體A 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH5.0   Citrate Buffer,0.5M,pH5.0   常溫保存人 CD14 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH5.5   Citrate Buffer,0.5M,pH5.5   常溫保存人 Caspase-10 轉(zhuǎn)錄變體A 基因全長(zhǎng)ORF克隆

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH6.0   Citrate Buffer,0.5M,pH6.0   常溫保存人 ADCK5 基因全長(zhǎng)ORF克隆

公司產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：
1，全：公司提供上萬(wàn)種產(chǎn)品，涵蓋了生物試劑，elisa試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基，原裝耗材等，基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
2，新：產(chǎn)品更新速度較快，基本上每周都有新產(chǎn)品出現(xiàn)。
3，優(yōu)：產(chǎn)品質(zhì)量好，零投訴。
4，品牌多：公司代理的試劑品牌：Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等進(jìn)口品牌，國(guó)產(chǎn)品牌我們價(jià)格更優(yōu)，我們供應(yīng)優(yōu)級(jí)純，分析純，化學(xué)純，試劑級(jí)，基準(zhǔn)試劑，實(shí)驗(yàn)純，教學(xué)試劑，高純?cè)噭?，色譜純，光譜純，電子純等試劑級(jí)別（可根據(jù)客戶(hù)需求定制）。
5，售后：我公司具有上等的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，產(chǎn)品一旦售出，產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到困難可提供在線(xiàn)技術(shù)咨詢(xún)。使您使用產(chǎn)品時(shí)沒(méi)有任何的后顧之憂(yōu)。