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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:大鼠磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(pCREB1)免費代測ELISA Kit

  • 產(chǎn)品型號:PR106408
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
大鼠磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(pCREB1)免費代測ELISA Kit檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
詳情介紹:

我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

大鼠磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(pCREB1)免費代測ELISA Kit

英文名稱

 Rat phosphorylated cAMP responsive element binding protein 1 (pCREB1) ELISA kit

貨號

PR106408

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。

樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

注意事項:

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
棕櫚酸乙酯 Palmitic acid ethyl ester 628-97-7 20mg

250m Lysis Buffer with Triton  Lysis Buffer with Triton  常溫保存

100次 動物種屬鑒定PCR Mix 4(28S rDNA D1-D2區(qū)) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯-MUG LST-MUG 1000ml

2 ug pcDNA3.1/V6-His B pcDNA3.1/V6-His B 低溫運輸,-20℃保存

齊墩果酮酸 3-Oxooleanolic acid 17990-42-0 10mg

50T 豬細小病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

5mg 氨基喋呤 Aminopterin -20℃保存

O157成套生化鑒定管  11種*1套/盒*10盒

2 ug pBlueBacHis2 A pBlueBacHis2 A 低溫運輸,-20℃保存

20次 DNA粘轉(zhuǎn)平試劑盒 DNA Polishing Kit -20℃保存

Andrade氏糖類肉湯 Andrade’s Carbohydrate Broth 250g

大鼠磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(pCREB1)免費代測ELISA Kit羊特定基因序列(Ovine)核酸檢測試劑盒 15.6-1000 pg/mL人 Transferrin / TF ELISA配對抗體

雞特定基因序列(Chicken)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 78-5000 pg/mL甲型流感 H9N2 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體

雞特定基因序列(Chicken)核酸檢測試劑盒 78-5000 pg/mL甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體

鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 6.25-400 ng/mL人類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 / Capsid Protein p24 ELISA配對抗體

鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測試劑盒 6.25-400 ng/mL人 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A ELISA配對抗體

鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 15.6-1000 pg/mL人 Endoglin / CD105 / ENG ELISA配對抗體

鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒 15.6-1000 pg/mL人 IL1R2 / IL1RB / CD121b ELISA配對抗體

鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 0.156-10 ng/mL人 IL17RA / CD217 ELISA配對抗體

鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測試劑盒 0.156-10 ng/mL人 Apolipoprotein H / APOH ELISA配對抗體

魚特定基因序列(Fish)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 0.156-10 ng/mL人 CD40 / TNFRSF5 ELISA配對抗體

操作流程:
1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

 


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