運輸和保存：

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

中國倉鼠卵巢細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;CHO-K1- COGFP-PURO

英文名稱	CHO-K1 -COGFP	產(chǎn)品形態(tài)	上皮細(xì)胞樣 貼壁生長
貨號	P-X11307	產(chǎn)品分類	倉鼠
規(guī)格	1×106	包裝	株
來源	卵巢	用途	僅供科研研究使用

細(xì)胞特性：

細(xì)胞別稱；CHO-K1 -COGFP；中國倉鼠卵巢細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記；中國倉鼠卵巢細(xì)胞-CHO-K1 -COGFP

種屬來源；倉鼠

組織來源；卵巢

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；Luciferase CHO-K1 細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白標(biāo)記。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定?？捎米骶G色熒光蛋白標(biāo)記活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。CHO-K1細(xì)胞是源自成年中國倉鼠卵巢深入活體組織切片的CHO細(xì)胞的亞克??；CHO-K1細(xì)胞的生長需要脯氨酸。puro藥篩濃度

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

保藏機構(gòu)；ATCC; CCL-61 ATCC; CRL-9618 BCRC; 60006 BCRJ; 0069 DSMZ; ACC-110 ECACC; 85051005

培養(yǎng)基；DMEM+10% FBS+PS+10ug/ml 脯氨酸+4. 0ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM（推薦iCell-0012）培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min，棄去上清液，加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6 cm 皿中，加入約 4 mL 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，棄去 消化液，將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細(xì)胞消化情況而定) ，然后在顯微鏡下 觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞，裝入無菌離心管中，1000 rpm 條件下離心 4 min，棄去上清液， 用 PBS 清洗一遍，棄盡 PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度 5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍 存管凍存 1mL 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ISLR2蛋白抗體	大鼠甘油三酯(TG)elisa檢測試劑盒
ISLR2	人體腫瘤β－catenin突變熒光分析試劑盒
碳酸酐酶6抗體	猴elisa檢測試劑盒
CA6	小鼠二胺氧化酶(DAO)elisa檢測試劑盒
小鼠GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)elisa檢測試劑盒	凋亡細(xì)胞富集試劑盒 20T
肌酸激酶測試盒	細(xì)胞色素P450 A43抗體 CYP3A43
CASPASE-2蛋白共沉淀分析試劑盒	細(xì)胞周期依賴性激酶抑制相關(guān)蛋白抗體 P15RS
磷酸化蛋白富集試劑盒100T	ZIM3蛋白抗體 ZIM3
雷帕霉素靶蛋白抗體 MTOR	β細(xì)胞素抗體 Beta cellulin
脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 FABP4	ATP5G2蛋白抗體 ATP5G2
腫瘤壞死因子配體超家族成員12A（CD266）抗體 TNFRSF12A/CD266	bFGF重組兔單克隆抗體 FGF2
肝果糖激酶抗體 Ketohexokinase	跨膜蛋白SEMA4G抗體 SEMA4G
高遷移率族蛋白2抗體 HMGB2	LSM11蛋白抗體 LSM11
KIAA1191蛋白抗體 KIAA1191	中國倉鼠卵巢細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;CHO-K1- COGFP-PURO醛縮酶2抗體 ALDOB
溶質(zhì)載體家族22成員13抗體 SLC22A13	大鼠血小板反應(yīng)蛋白2(THBS2)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞P35蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒	食物D-半乳糖含量光譜法定量檢測試劑盒

三、培養(yǎng)注意事項:

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。