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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:槐凝集素(SJA)ELISA試劑盒步驟

  • 產(chǎn)品型號:PS110932
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
槐凝集素(SJA)ELISA試劑盒步驟檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
詳情介紹:

我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

槐凝集素(SJA)ELISA試劑盒步驟

英文名稱

Sophora japonica agglutinin,SJA ELISA Kit

貨號

PS110932

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
100mL ADA Buffer,0.5M,pH6.0   ADA Buffer,0.5M,pH6.0   常溫保存

20次 裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒(含高效轉(zhuǎn)化液) S. pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit 常溫

茜素-β-半乳糖苷肉湯(Aliz-gal肉湯) Aliz-gal Broth 100g

2 ug pCMV-SPORT6 PPP2CB pCMV-SPORT6 PPP2CB 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

異珊瑚菜素 Cnidilin 14348-22-2 5mg

1%NaCl蛋白胨水生化鑒定管 供耐氯化鈉的弧的靛基質(zhì)試驗(yàn)用。 20支/盒

5g 膽酸 Cholic Acid 室溫保存

杯莧甾酮 Cyasterone 17086-76-9 20mg

100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH6.5   Bis-Tris Propane,0.2M,pH6.5   常溫保存

10管 穿刺培養(yǎng)基 Stab Medium 4℃保存

麥芽糖發(fā)酵管  20支

2 ug pHCMC05 pHCMC05 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

槐凝集素(SJA)ELISA試劑盒步驟ELISA Kit for Human Embryonic growth/differentiation factor 1 0.156-10 ng/mL人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人膠質(zhì)瘤病程相關(guān)蛋白1(GliPR 1)ELISA試劑盒 0.78-50 ng/mL小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human Glioma pathogenesis-related protein 1 0.78-50 ng/mL小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人膠原性神經(jīng)營養(yǎng)因子家族受體α-1 (GDNF receptor alpha-1)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL人 IGFBP7 / IBP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human GDNF family receptor alpha-1 0.156-10 ng/mL人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human Glycogen synthase kinase-3 beta 0.156-10 ng/mL人 RGMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人糖蛋白Ⅴ(GPV)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein V 0.156-10 ng/mL甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人間隙連接α-1蛋白(GJA1)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

操作流程:
1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

 

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