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英文簡稱
規(guī)格
貨號(hào)
SCC15
1×106
P-X9452
產(chǎn)品詳情:
細(xì)胞別稱;SCC15細(xì)胞, 人舌鱗癌細(xì)胞
種屬來源;人
組織來源;舌癌
生長特性;貼壁生長
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
背景簡介;人鱗狀細(xì)胞癌是一種惡性皮膚腫瘤,其特征是鱗狀細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化并形成腫瘤。SCC-15是其中一種具有特定生物學(xué)特性的細(xì)胞系,可以從患者身上獲得并用于研究目的。 人鱗狀細(xì)胞癌SCC-15細(xì)胞系具有一些與其他鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系相似的生物學(xué)特性,如細(xì)胞角蛋白表達(dá)、細(xì)胞間連接和細(xì)胞殖等。這些細(xì)胞系通常用于研究鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展和等,以及評(píng)估新藥和方案的療效和性。 需要注意的是,人鱗狀細(xì)胞癌SCC-15細(xì)胞系是一種腫瘤細(xì)胞系,具有高度異質(zhì)性,不同的細(xì)胞系可能會(huì)表現(xiàn)出不同的生物學(xué)特性。因此,在研究中應(yīng)該注意選用符合要求且規(guī)范的SCC-15細(xì)胞系,并在使用前對其生物學(xué)特性進(jìn)行評(píng)估和確認(rèn)。
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測;無
培養(yǎng)基;DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:
1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜
。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例:
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實(shí)驗(yàn)原理:
實(shí)驗(yàn)步驟:
1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。
公司正在出售的產(chǎn)品:
猴三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa生化檢測試劑盒 |
犬白介素4(IL-4)elisa檢測試劑盒 |
T3 ELISA kit |
革蘭氏陰性基因組DNA純化試劑盒 |
人肥大細(xì)胞類羧肽酶elisa生化檢測試劑盒 |
一氧化氮NO測試盒酶法 50管/48樣 25管/24樣 比色法 |
HumanMastCellCarboxypeptidaseELISAKit |
核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒 |
動(dòng)物軟骨組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒 |
大鼠網(wǎng)膜素(omentin)elisa檢測試劑盒 |
大鼠胰島素受體β(ISR-β)elisa檢測試劑盒 |
突觸后密度蛋白93重組兔單克隆抗體 PSD93/DLG2 |
通用型維生素A含量比色法定量檢測試劑盒 |
微管蛋白聚合促進(jìn)蛋白24 TPPP |
小鼠SCAF11蛋白(SFRS2IP/CASP11)elisa檢測試劑盒 |
RSPO4蛋白抗體 RSPO4 |
角蛋白相關(guān)蛋白KAP27.1抗體 KAP27.1 |
SH3RF3蛋白抗體 SH3RF3 |
乙?;M蛋白H2B (Lys116)抗體 Histone H2B (Acetyl K116) |
8號(hào)染色體開放閱讀框84抗體 C8orf84 |
應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1重組兔單克隆抗體 STIP1 |
AF594標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體 PAX6, Alexa Fluor 594 conjugated |
二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體 CRMP5 |
鉀離子通道蛋白家族成員2抗體 KCNE2 |
防凍蛋白IV型 (Danio rerio) 抗體 AFP4b |
G蛋白偶聯(lián)受體183抗體 GPR183 |
GRAMD1C蛋白抗體 GRAMD1C |
SCC-15細(xì)胞囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B VAPB |
浦肯野細(xì)胞萎縮相關(guān)蛋白1抗體 Puratrophin 1 |
人甲胎蛋白(AFP)elisa檢測試劑盒 |
體液HHV6(HUMAN HERPESVIRUS 6)病毒 |
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 TIMP-1 elisa檢測試劑盒 |