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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人早幼粒白血病細(xì)胞+LUC;HL-60-LUC

  • 產(chǎn)品型號(hào):P-X11278
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
人早幼粒白血病細(xì)胞+LUC;HL-60-LUC公司正在出售的產(chǎn)品:Spc-a-1(肺腺癌細(xì)胞) 嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體 PⅣNP ELISA Kit Ⅳ型前膠原氨基末端肽定量elisa kit 上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體 Saos-2骨肉瘤細(xì)胞
詳情介紹:

人早幼粒白血病細(xì)胞+LUC;HL-60-LUC

英文名稱

HL-60-LUC

產(chǎn)品形態(tài)

母細(xì)胞樣 懸浮生長

貨號(hào)

P-X11278

產(chǎn)品分類

規(guī)格

1×106

包裝

來源

外周血;早幼粒細(xì)胞

用途

僅供科研研究使用

細(xì)胞特性:

細(xì)胞別稱;HL-60-LUC;人早幼粒白血病細(xì)胞-LUC;人早幼粒白血病細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

種屬來源;人

組織來源;外周血;早幼粒細(xì)胞

生長特性;懸浮生長

細(xì)胞形態(tài);母細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)

背景簡介;Luciferase HL-60細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測(cè)中的陽性對(duì)照,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。HL-60是一株早幼粒細(xì)胞。外周血白細(xì)胞來自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人女性。 HL-60 自發(fā)分化,丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸可以促進(jìn)分化。細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,并對(duì)趨化刺激有響應(yīng)。致癌基因myc表達(dá)陽性

生物等級(jí);1

細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè);無

保藏機(jī)構(gòu);ATCC; CCL-240 BCRC; 60027 BCRJ; 0104 DSMZ; ACC-3 ECACC; 98070106

培養(yǎng)基;80%IMDM+20%FBS +PS+0.5ug/ml puro

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件;無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

運(yùn)輸和保存:

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。



細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。                      
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min,棄去上清液,加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6 cm 皿中,加入約 4 mL 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,棄去 消化液,將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細(xì)胞消化情況而定) ,然后在顯微鏡下 觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm 條件下離心 4 min,棄去上清液, 用 PBS 清洗一遍,棄盡 PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度 5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍 存管凍存 1mL 細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。 
9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:

皮質(zhì)醇(Cortisol)elisa生化檢測(cè)試劑盒

人肝臟甘油三脂脂肪酶(HTGL)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

Whale Cortisol ELISA Kit

大鼠白介素2IL2elisa檢測(cè)試劑盒

人蛋白ATP1B4(ATP1B4)elisa生化檢測(cè)試劑盒

小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)elisa分析檢測(cè)試劑盒

HumanATP1B4ELISAKit

植物丙二醛(MDA)比色法定量檢測(cè)試劑盒

植物磷脂酶DPhospholipase D)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

CC趨化因子受體2(CCR2)elisa分析檢測(cè)試劑盒

人高靈敏度促甲狀腺(U-TSH)elisa分析檢測(cè)試劑盒

衰老相關(guān)Sigma受體蛋白抗體 OPRS1

大鼠果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)elisa檢測(cè)試劑盒

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK2抗體 SRPK2

亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒

PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD44單克隆抗體 mouse CD44/PE-Cy5

環(huán)指蛋白70抗體 RNF70

PE標(biāo)記人CD269 (BCMA)單克隆抗體 human CD269 (BCMA)/PE

鋅指蛋白93抗體 ZNF93

組蛋白去乙?;?span>6重組兔單克隆抗體 HDAC6

雄受體單克隆抗體

17β羥類固醇脫氫酶7抗體 HSD17B7

促甲狀腺素β亞單位抗體 TSHB

紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體 Ankyrin-1

蛋白BOC抗體 Protein BOC

FAM19A3蛋白抗體 FAM19A3

ENOX1蛋白抗體 ENOX1

人早幼粒白血病細(xì)胞+LUC;HL-60-LUC磷酸化糖原合酶激酶3β抗體 phospho-GSK-3 Beta (Ser21)

磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 phospho-TRIM28 (Ser473)

小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa檢測(cè)試劑盒

NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒

大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)elisa檢測(cè)試劑盒


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