咨詢電話：18117197628
英文簡稱
規(guī)格
貨號
KB:KB
1×106
P-X808
產品詳情：
細胞別稱：KB；人口腔表皮樣癌細胞
種屬來源：人
年齡性別：30歲
組織來源：口腔
生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
背景簡介：初認為這個細胞源自口腔表皮癌，但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋分析發(fā)現，起源細胞已被HeLa污染。角蛋白陽性。有報告稱，KB細胞含有人瘤病毒18(HPV-18)序列。
生物等級：2
細胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無
基因表達情況：keratin
保藏機構：ATCC; CCL-17 BCRJ; 0128 DSMZ; ACC-136 ECACC; 86103004 ECACC; 94050408
培養(yǎng)基：90%MEM+10% FBS
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
倍增時間：~30 hours
STR鑒定位點Amelogenin：X；CSF1PO：9，10；D13S317：12，14；D16S539：9，10；D18S51：16；D19S433：13，14；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：11，12；D7S820：8，12；D8S1179：12，13；FGA：21；TH01：7；TPOX：8，12；vWA：16，18;
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二．細胞處理：
1）凍存細胞的復蘇：：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜
。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實驗原理：
實驗步驟：
1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上，利用293T細胞進行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉染前24 h進行細胞鋪板，轉染時細胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉細胞系。
公司正在出售的產品：
|
角蛋白相關蛋白11-1抗體 |
賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體 LOXL4 |
|
KAP11.1 |
細胞角蛋白71抗體 KRT71 |
|
APXL蛋白抗體 |
ATP調節(jié)鉀離子通道ROM K抗體 ROM-K/Kcnj1 |
|
APXL |
APC-Cy7標記小鼠CD45R單克隆抗體 mouse CD45R/APC-Cy7 |
|
細胞生長抑制基因39蛋白抗體 FAM129A |
細胞抗原6G抗體 Ly-6G |
|
T細胞瘤浸潤和轉移蛋白2抗體 TIAM2 |
溶血磷脂酶1抗體 Lysophospholipase 1 |
|
α-(1,3)-巖藻糖基轉移酶 4 FUT4 |
IV型己糖激酶抗體 IGLK |
|
熱休克蛋白70蛋白4抗體 HSPA4 |
KIAA1683蛋白抗體 KIAA1683 |
|
冰凍切片組織CYP1A2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 |
真核翻譯起始因子3H抗體 eIF3H |
|
植物RNA提取試劑盒 50次 |
脂質運載蛋白相互作用膜受體蛋白抗體 LMBR1L |
|
體液亮（leucine）含量比色法定量檢測試劑盒 |
鈣腔蛋白單克隆抗體 Calumenin |
|
小鼠半乳糖凝集素1(Galectin-1)elisa檢測試劑盒 |
干擾素調節(jié)因子7抗體 IRF7 |
|
人U型肌酸激酶,線粒體(CKMT1A)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠碳酸酐酶Ⅸ(CA9)elisa檢測試劑盒 |
|
細胞磷酸二酯酶（50042.1）總活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒 |
KB人口腔表皮癌細胞大鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)elisa檢測試劑盒 |
|
大鼠D二聚體(D2D)elisa檢測試劑盒 |
血清蛋白提取試劑盒100T |
|
小鼠剪接因子3B亞基3(SF3B3)elisa檢測試劑盒 |
體液氧化型甘肽（GSSG）濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒 |