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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:hct-15人結(jié)腸癌細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號(hào):P-X737
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
hct-15人結(jié)腸癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:HCC 38人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞貼壁細(xì)胞上皮細(xì)胞樣HCC 38:HCC 38人細(xì)胞系組織來源:乳腺;/導(dǎo)管土壤多酚氧化酶(PPO)測試盒大鼠細(xì)胞核因子κB受體活化因子配基(RANKL)elisa檢測試劑盒
詳情介紹:

hct-15人結(jié)腸癌細(xì)胞

英文名稱

hct-15:hct15

產(chǎn)品形態(tài)

上皮細(xì)胞樣 貼壁生長

貨號(hào)

P-X737

產(chǎn)品分類

人細(xì)胞系

規(guī)格

1×106

包裝

來源

結(jié)直腸腺癌

用途

僅供科研研究使用


細(xì)胞特性:

細(xì)胞別稱:HCT-15; HCT15;人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

種屬來源:人

年齡性別:男

組織來源:結(jié)直腸腺癌

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

背景簡介:DNA指紋鑒定證據(jù)表明,HCT-15細(xì)胞和DLD-1細(xì)胞來源于同一個(gè)人;但同工酶及細(xì)胞染色體組型分析仍存疑問。HCT-15細(xì)胞呈CSAp陰性(CSAp-);HCT-15角蛋白過氧化物酶染色陽性。該細(xì)胞能合成復(fù)合胺,腎上腺素。

生物等級(jí):1

細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測:無

基因表達(dá)情況:carcinoembryonic antigen (CEA) 5.4 ng/10^6 cells/10 days. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CCL-225 BCRC; 60539 DSMZ; ACC-357 ECACC; 91030712

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10% FBS

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件:無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間:~20-25 hours

STR鑒定位點(diǎn)AmelogeninX,Y;CSF1PO12;D13S3178,11;D16S53912,13;D18S5111,17;D19S43314,16;D21S1129,32.2;D2S133817,25D3S135817;D5S81813;D7S82010,12;D8S117915;FGA22;TH017,9.3;TPOX8,11;vWA18,19;

 

運(yùn)輸和保存:

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。


細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。                      
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 4 mL 培養(yǎng)基混 合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min,棄去上清液,加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜 (或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6 cm 皿中,加入約 4 mL 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜) 。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,棄去 消化液,將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min (視細(xì)胞消化情況而定) ,然后在顯微鏡下 觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm 條件下離心 4 min,棄去上清液, 用 PBS 清洗一遍,棄盡 PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度 5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍 存管凍存 1mL 細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。 
9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:

核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)因子3(RFT3)elisa分析檢測試劑盒

回腸絨毛刷狀緣膜蛋白抗體

RFT3 ELISA Kit

轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEF4抗體  Anti-TEF4/TEA domain family member 2

人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sR)elisa分析檢測試劑盒

C3orf65

HumanIL-1sRELISAkit

3號(hào)染色體開放閱讀框65抗體

磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6  Anti-phospho-PAK6(Ser165)

NAALADL1

Nemo樣激酶抗體  Anti-Nemo-like kinase

英文名

雌調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體  Anti-LIV-1/SLC39A6

DIP2C蛋白抗體

中文名

DIP2C

大鼠催乳素(PRL)elisa分析檢測試劑盒

膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體  Anti-SREBP-2

PRL ELISA Kit

孤菲肽/痛敏肽抗體  Anti-Nociceptin

人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAP)elisa分析檢測試劑盒

磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶受體RET抗體  Anti-phospho-Ret/HSCR1(Tyr1062)

CTAPELISAKit

酮基移換酶樣蛋白1抗體  Anti-TKTL1

6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒

大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)elisa檢測試劑盒

小鼠Toll樣受體4(TLR4)elisa檢測試劑盒

hct-15人結(jié)腸癌細(xì)胞CASPASE-5蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體

芳香基硫酸酯酶F抗體

KCTD11

ARSF

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