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需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
RealSYBR Mixture |
5ml |
BH-01S3780 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗(yàn): X =99%;
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1(GFRα1)重組蛋白Recombinant Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor Receptor Alpha 1 (GFRa1)
人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白1(KRT1)重組蛋白Recombinant Keratin 1 (KRT1)
小鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白14(KRT14)重組蛋白Recombinant Keratin 14 (KRT14)
豬潑尼松龍(Prednisolone)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白15(KRT15)重組蛋白Recombinant Keratin 15 (KRT15)
大鼠損傷分子1(Kim-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白16(KRT16)重組蛋白Recombinant Keratin 16 (KRT16)
人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白18(KRT18)重組蛋白Recombinant Keratin 18 (KRT18)
人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白19(KRT19)重組蛋白Recombinant Keratin 19 (KRT19)
人上腺皮質(zhì)抗體(ACA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白2(KRT2)重組蛋白Recombinant Keratin 2 (KRT2)
兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白20(KRT20)重組蛋白Recombinant Keratin 20 (KRT20)
大鼠雌醇(E2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白5(KRT5)重組蛋白Recombinant Keratin 5 (KRT5)
小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 角蛋白4(KRT4)重組蛋白Recombinant Keratin 4 (KRT4)
RealSYBR Mixture精子 高純分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
精子 總蛋白萃取試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
精子 總核蛋白萃取試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
精子 核蛋白核堿性蛋白(nuclear basic protein)萃取試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
精子 膜蛋白萃取試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
大鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SKOV3/Taxol-25, 卵巢癌紫杉醇耐藥株
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMC-1(胸膜瘤)5×106cells/瓶×2
人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMMC-7221/肝癌株國產(chǎn)
人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMMC-7221全裂解液100ug100ug
人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMMC-7721(肝癌)5×106cells/瓶×2
兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SNU-5(胃癌)5×106cells/瓶×2
小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)
大鼠表皮生長因子受體2(Her2)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 SP Mouse HRP Kit/鼠Streptavidin-HRP試劑盒3ml、18ml國產(chǎn)
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)/兔&鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)
人抗核周因子抗體(APF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Rabbit HRP Kit(DAB)/兔Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國產(chǎn)
人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Rabbit & Mouse HRP Kit、兔/鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒3ml、18ml國產(chǎn)
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。