需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測(cè)器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系1個(gè)，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、超純水。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：操作時(shí)間短，48-50T，可測(cè)40例樣本左右，96-100T,可測(cè)80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè)，部分試劑盒取樣多少請(qǐng)；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測(cè)植物。

測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

人血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Caco-2，結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

小鼠白三烯E4（LTE4）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  CaCO2/結(jié)腸癌細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)

小鼠瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CaCO2全細(xì)胞裂解液100ug100ug

大鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CaES-17(食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

雞總膽固醇（TC）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  CaEs-17, 食管癌細(xì)胞株

人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Caki-1(腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Caki-1, 腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞

人乙肝表面抗原（HBsAg）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  Caki-2(腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  CAL-27(舌鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Calu-3(肺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

魚脫碘酶1（DIO1）ELISA檢測(cè)試劑盒96T/48TELISA  Calu-1(肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

?；o酶 A 氧化酶EC1.3.3.6載玻片  PAR-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

 冰凍切片組織PAR-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

 石蠟切片組織PAR-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

   PAR-3蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10/50 次

   PAR-3蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10/50 次

人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺癌英文名稱：LCC1

人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺癌英文名稱：MDA-MB-231

人瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺癌英文名稱：HCC1937

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺癌英文名稱：Hs 578T

豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺癌英文名稱：MDA-MB-231

大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺癌英文名稱：MX-1

犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺成纖維完全培養(yǎng)基100mL

人庚肝抗體（HGVAb）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺成纖維完全培養(yǎng)基100mL

人羥脯氨酸(Hyp)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺導(dǎo)管癌英文名稱：MDA-MB-435S

小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺上皮完全培養(yǎng)基100mL

山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  乳腺導(dǎo)管癌英文名稱：BT474

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。