需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個，0.22μm）、濾膜（水系1個，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個，2mL）、超純水。

優(yōu)點如下：

1、快速簡便：操作時間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗： X =99%；

6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強；

7、測試面廣：可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點如下：

1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗： X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。

8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  EB-3(Burkitt淋瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  EBTr (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  EBV-轉(zhuǎn)化淋細(xì)胞英文名稱：CAM191

大鼠間羥上腺素（MN）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  EBV-轉(zhuǎn)化淋細(xì)胞英文名稱：Peng

雞孕**/孕酮（PROG）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  EBV-轉(zhuǎn)化淋細(xì)胞英文名稱：MAO

人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  EBV-轉(zhuǎn)化淋細(xì)胞（彝族）英文名稱：KM9304

人淋細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  EC109，食管癌細(xì)胞

人胰激肽原酶(PK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Eca-109(食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠蛋白質(zhì)硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  ECV-304(臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  eECL Western Blot Kit/高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒250ml25ml、100ml、250ml

魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 50x)100ml國產(chǎn)

酰基輔酶A合成酶EC 6.2.1.3AKT蛋白**共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次

AKT蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：25次

   P38蛋白表達(dá)流式  儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

載玻片  P38蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

冰凍切片組織P38蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  胃癌英文名稱：BGC-803

人腦鈉肽（BNP）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  胃癌英文名稱：HSC

人瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE/ADAM17)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  胃癌英文名稱：MGC-803

小鼠肌肉生長抑制素/肌抑素（MSTN）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  胃癌英文名稱：SGC-7901

豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  胃癌（未分化）英文名稱：HGC-27

大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  胃腸道間質(zhì)瘤英文名稱：GIST

犬血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  胃腺癌英文名稱：AGS

人高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  胃粘膜上皮完全培養(yǎng)基100mL

人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  胃粘膜英文名稱：GES-1

小鼠抗核抗體（ANA）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  小腸粘膜上皮完全培養(yǎng)基100mL

山羊腦啡肽（ENK）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  小腸平滑肌完全培養(yǎng)基100mL

注意事項：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。