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注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
IMDM培養(yǎng)基 |
500ml |
BH-01S3864 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強;
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
小鼠補體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物維生素A(VA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 ME-180(**頸表皮癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
人抗狂犬病毒抗體(anti-RV)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
人腺病毒(ADV)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
小鼠C型鈉尿肽(CNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MFC(小鼠胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠血管**素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2
大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 MG-63(骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MG-63, 骨肉瘤細(xì)胞
人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MGC80-3(胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MGC80-3(MGC-803)胃癌細(xì)胞
IMDM培養(yǎng)基冰凍切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
石蠟切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
CASPASE-3蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
CASPASE-3蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
人催素(PRL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠腎上皮完全培養(yǎng)基100mL
人磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠腎實質(zhì)完全培養(yǎng)基100mL
人乙胺碘呋酮(AD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠腎系膜完全培養(yǎng)基100mL
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠腎小管平滑肌完全培養(yǎng)基100mL
魚尿苷磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UDPGT)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠腎小管上皮完全培養(yǎng)基100mL
大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠腎小球內(nèi)皮完全培養(yǎng)基100mL
牛結(jié)核(TB)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠腎足突完全培養(yǎng)基100mL
人毒性休克綜合征**1(TSST-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠食管平滑肌完全培養(yǎng)基100mL
人**球蛋白重鏈(IgH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠食管上皮完全培養(yǎng)基100mL
小鼠過氧化氫酶(CAT)ELISA 試劑盒48T/96T試劑盒 小鼠視網(wǎng)膜色素上皮完全培養(yǎng)基100mL
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠視網(wǎng)膜muller完全培養(yǎng)基100mL