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需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個(gè),0.22μm)、濾膜(水系1個(gè),0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個(gè),2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
SHP-2 Phospho-Tyr542 Antibody |
詳見說明 |
BH-01S4156 |
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:操作時(shí)間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗(yàn): X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測試面廣:可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人促腎上腺皮質(zhì)**(ACTH)ELISA Kit
潮霉素B
大鼠舒緩激肽(BK)ELISA Kit
超快核酸電泳液(干粉)(20 L)
人蛋白激酶B(PKB)ELISA Kit
大腸桿菌M15感受態(tài)細(xì)胞
大鼠白介素1(IL-1)ELISA Kit
人鈣聯(lián)蛋白(CNX)ELISA Kit
DNA
大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA Kit
大提無內(nèi)**質(zhì)粒DNAout
牛肺炎支原體PCR檢測試劑盒
人脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)ELISA Kit
SHP-2 Phospho-Tyr542 Antibody1瓶 HCT-8 株 HCT-8 低溫運(yùn)輸和保存
2 ug pEYFP-mem pEYFP-mem 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug PUMVC(Retrovirus packaging, 700) PUMVC(Retrovirus packaging, 700) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250mL Succinate Buffer(琥珀酸緩沖液),0.2M,pH6.0 Succinate Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存
30次 一站式蛋白質(zhì)非變性PAGE套裝(中pH 緩沖液套) One-Stop Protein Native PAGE Pack 常溫保存(上樣液需要-20℃保存)
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)顆粒 Violet Red Bile Agar 300ml/袋*10
乳酸桿菌選擇性瓊脂 Lactobacillus Selective Agar 250g
50次 柱式血液DNA-RNAout Column Blood DNA-RNAOUT 4℃保存
**熒光 流式儀完全間接檢測試劑盒(含一抗和熒光二抗) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
**熒光 流式儀直接檢測試劑盒(含熒光一抗) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
** 化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
** 化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
** 化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB完全間接檢測試劑盒(含一抗和HRP二抗) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。