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需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
CPI17α Ab-38 Antibody |
詳見說明 |
BH-01S4456 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強;
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
氧化金 Gold oxide,89% 1303-58-8 250MG
半二甲酚橙 Semixylenol orange 19329-67-0 5G
二氯異腈脲酸鈉 Sodium dichloroisocyanurate,96% 2893-78-9 100G
對氨基苯磺酸 Sulfanilic acid,≥99.0% 121-57-3 25G
達旦黃 Titan yellow 1829-00-1 5G
N-乙基-N-(3-磺丙基... N-Ethyl-N-(3-sulfopropyl)-3-methylanil... 40567-80-4 250MG
鎂試劑Ⅰ MagnesonⅠ,90% 74-39-5 50G
2-(4-叔丁基苯)-5-(... 2-(4-tert-Butylphenyl)-5-(4-biphenylyl... 15082-28-7 5G
暈苯 Coronene,97% 191-07-1 100MG
1,3,5-三溴苯 1,3,5-Tribromobenzene,98% 626-39-1 5G
DL-酒石酸 DL-Tartaric acid,99% 133-37-9 100G
順-15-二十四碳單烯酸 Nervonic acid,≥99% 506-37-6 100MG
硅鎢酸 Silicotungstic acid hydrate,≥99.9% 12027-43-9 10G
CPI17α Ab-38 Antibody2 ug psiCHECK-2 psiCHECK-2 低溫運輸,-20℃保存
250mL PIPES Buffer,1.0M, pH6.5 PIPES Buffer,1.0M, pH6.5 常溫保存
1個 0.5mLDNA超濾離心管(30-50KD)
30次 一站式CTAB-PAGE電泳套裝
不完全瓊脂培養(yǎng)基 Incomplete Agar Medium 250g
伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基平板 用于分離腸道致病菌,特別是大腸菌群和糞大腸菌群。(GB、美國FDA、ISO、USP) 90mmX20個
10次 小RNA克隆試劑盒 Small RNA Cloning Kit -20℃保存
100 T 過氧化氫酶測試盒(可見光比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑盒(MMP2/9) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:5/10次
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。