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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng):DH5α 含pUC19質(zhì)粒 大腸桿菌說(shuō)明書(shū)
拉丁文: Escherichia coli DH5α( pUC19)
提供形式: 西林瓶,菌片
**等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: pUC19質(zhì)粒提取。
培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基,含50μg/mL氨芐青霉素鈉。
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min**。 **結(jié)束,冷卻降溫后加入氨芐青霉素鈉,使培養(yǎng)基中氨芐青霉素鈉*終含量為50μg/mL。
生長(zhǎng)條件: 37℃ ,好氧
存儲(chǔ)條件: -20℃避
本公司產(chǎn)品僅用科研實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品名稱(chēng) |
DH5α 含pUC19質(zhì)粒 大腸桿菌說(shuō)明書(shū) |
英文名稱(chēng) |
Escherichia coli DH5α( pUC19) |
貨號(hào) |
BH-J011031 |
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
大鼠β淀粉樣蛋白42(Aβ42)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠膽固醇7α-羥化酶(CYP7A1) 吸附測(cè)定試劑盒
大鼠α-骨膠原交聯(lián)(α-CTx)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠β-骨膠原交聯(lián)(β-CTx)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠甘丙肽受體1(GALR1)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠甘丙肽受體2(GALR2)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠甘丙肽受體3(GALR3)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠甘丙肽受體4(GALR4)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠白介素2受體β(IL-2Rβ)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠蛋白酶原A(PGA)吸附測(cè)定試劑盒
大鼠蛋白酶原G(PGG)吸附測(cè)定試劑盒
DH5α 含pUC19質(zhì)粒 大腸桿菌說(shuō)明書(shū)石英砂(AR,8-16目或1-2mm)CAS號(hào):14808-60-7AR,8-16目或1-2mmSand
95%乙醇(光譜純)CAS號(hào):64-17-5光譜純Ethanol (95%)
磷酸二氫銨(SP)CAS號(hào):7722-76-1SPAmmonium phosphate monobasic
二硫化碳(光譜純,≥99.5%(GC))CAS號(hào):75-15-0光譜純,≥99.5%(GC)Carbon disulfide
甲基叔丁基醚(ACS光譜級(jí),≥99.8%(GC))CAS號(hào):1634-04-4ACS光譜級(jí),≥99.8%(GC)tert-Butyl methyl ether
1,4-雙[2-(2-甲基苯基)乙烯基]苯(99%)CAS號(hào):13280-61-00.991,4-Bis(2-methylstyryl)benzene
苯(光譜級(jí), ≥99.7%)CAS號(hào):71-43-2光譜級(jí), ≥99.7%Benzene
環(huán)己烷(ACS光譜級(jí),≥99.5%(GC))CAS號(hào):110-82-7ACS光譜級(jí),≥99.5%(GC)Cyclohexane
四氯化碳(光譜純,≥99.0%)CAS號(hào):56-23-5光譜純,≥99.0%Carbon tetrachloride
二甲基亞砜(光譜級(jí),>99.9% (GC))CAS號(hào):67-68-5光譜級(jí),>99.9% (GC)Dimethyl sulfoxide
基本概念:
(1)菌群:由多種合組成的相對(duì)穩(wěn)定的群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬:菌種的上分類(lèi),通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是基本的分類(lèi)單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到保存時(shí),菌種是指的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株。