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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
上皮細(xì)胞粘附分子抗體 |
英文名稱 |
Anti-EpCAM/CD326 |
貨號(hào) |
BH-K013523 |
英文名稱 上皮細(xì)胞粘附分子抗體
中文名稱 上皮細(xì)胞粘附分子抗體
別 名 Adenocarcinoma associated antigen; CD326; CD326 antigen; Cell surface glycoprotein Trop 1; CO17 1A; EGP; EGP40; Ep CAM; Epithelial cell surface antigen; Epithelial cellular adhesion molecule; Epithelial glycoprotein; GA733 2; hEGP 2; KS 1/4 antigen; KSA; Lymphocyte antigen 74; M1S2; M4S1; Major gastrointestinal tumor associated protein GA733 2; MIC18; MK 1; TACD1; TACSTD1; TROP1; Tumor associated calcium signal transducer 1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 **學(xué) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞表面分子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 35kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EpCAM C-terminus
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
PLK5 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶5抗體 0.2ml
CCDC88B/BRLZ/HkRP3 大腦亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.2ml
Ube2N/UBC13 泛素蛋白連接酶2N抗體 0.2ml
GPKOW G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 0.2ml
TRIM36/RNF98 環(huán)指蛋白98抗體 0.2ml
USP9X 泛素特異性蛋白酶9X抗體 0.2ml
p55/DCAF1 染色質(zhì)組裝因子1P55抗體 0.2ml
β-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體 0.1ml
CUEDC1 CUE結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
AGPHD1 氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.2ml
PDZD5A/FRMPD2L2 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體 0.2ml
Factor X 凝血因子10抗體 0.2ml
SLC39A11 溶質(zhì)載體家族39成員11抗體 0.2ml
上皮細(xì)胞粘附分子抗體1-(4-)吡唑分子式:159.19分子量: C9H9N3英文名稱:1- (4-)CAS號(hào):17635-45-9
檸檬酸鉍鉀分子式:495.98分子量: BiK2C6H7O7·H2O英文名稱:Bismuth citrateCAS號(hào):
3-羥-1-甲-5-三氟甲-1H-吡唑分子式:166.1分子量: C5H5F3N2O英文名稱:3- hydroxy -1- methyl -5- three -1H-CAS號(hào):119022-51-4
2-氟-3-甲胺分子式:125.14分子量: C7H8FN英文名稱:2- -3- methyl anilineCAS號(hào):1978-33-2
1,4-雙(α-羥六氟異丙)分子式:410.16分子量: C12H6F12O2·xH2O英文名稱:1,4- bis (alpha hydroxy six f Yi Bingji) benzeneCAS號(hào):1992-15-0
對(duì)叔丁氯分子式:168.66分子量: C10H13CL英文名稱:Para tert butyl chlorideCAS號(hào):3972-56-3
乙黃原酸鉀分子式:160.3分子量: C3H5KOS2英文名稱:Potassium ethyl potassiumCAS號(hào):140-89-6
丙正丁酯英文名稱:Butyl propionateCAS號(hào):590-01-2分子式:130.18分子量: C7H14O2
6-溴-2-氟吡分子式:175.9分子量: C5H3BrFN英文名稱:6- bromide -2-CAS號(hào):937379-49-2
2-巰-5-(三氟甲)吡分子式:179.16分子量: C6H4F3NS英文名稱:2- (three) -5-CAS號(hào):76041-72-0