抗體的種類：

抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的，體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對(duì)疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對(duì)D的功能了解較少。

（1） IgG：是血清中濃度大的一類球蛋白，約占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后，其產(chǎn)生時(shí)間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中，參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。

（2） IgM：由5個(gè)球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內(nèi)大的球蛋白?？乖醮未碳C(jī)體后，IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內(nèi)，可以通過激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免作用很強(qiáng)，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時(shí)間短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中，參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。

（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結(jié)構(gòu)，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在**表面，當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。

別    名   ERK1+ERK2(phospho T185+Y187+T202+Y204); ERK 1; ERK 2; ERK-2; ERK1; ERK2; ERT1; ERT2; Extracellular signal regulated kinase 1; Extracellular signal regulated kinase 1; Extracellular signal regulated kinase 2; Extracellular signal regulated kinase 2; Extracellular signal-regulated kinase 2; HS44KDAP; HUMKER1A; Insulin stimulated MAP2 kinase; MAP kinase 1; MAP kinase 2; MAP kinase isoform p42; MAP kinase isoform p44; MAPK 1; MAPK 2; MAPK1; MAPK2; MGC20180; Microtubule associated protein 2 kinase; Mitogen activated protein kinase 1; Mitogen activated protein kinase 1; Mitogen activated protein kinase 2; Mitogen-activated protein kinase 1; Mitogen-activated protein kinase 2; p38; p40; p41; p41mapk; p42 MAPK; p42-MAPK; p42MAPK; p42MAPK; p44 ERK1; p44 MAPK; p44ERK1; p44ERK1; p44MAPK; p44MAPK; PRKM 1; PRKM 1; PRKM 2; PRKM 2; PRKM1; PRKM2; Protein kinase mitogen activated 1; Protein kinase mitogen activated 1; Protein kinase mitogen activated 2; Protein kinase mitogen activated 2; Protein tyrosine kinas.
英文名稱  Anti-phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204)

中文名稱  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶ERK抗體

濃    度  1mg/1ml

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig

產(chǎn)品類型  一抗  磷酸化抗體

研究領(lǐng)域  **學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ERK1 around the phosphorylation site of Thr185/Tyr187+Thr202/Tyr204

亞    型  IgG 

本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。

抗體的熒光標(biāo)記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體反應(yīng)特點(diǎn)：

1.高度特異性，特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征，特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合；

2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為：Ag+AbAg·Ab；

3.適當(dāng)濃度和比例；

4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí)，化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml，定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。

抗體反應(yīng)的因素：

1.電解質(zhì) ：抗原抗體特異結(jié)合后，膠體粒便可發(fā)生脫水作用，此時(shí)易受電解質(zhì)影響，如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚，于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復(fù)，在此步驟后進(jìn)行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍(lán)色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。

14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

DCUN1D4  DCUN1D4蛋白抗體 0.2ml

APLP1  淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體 0.2ml

TRPM6  瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白6抗體（M亞家族） 0.2ml

PJA2/RNF131  環(huán)指蛋白131抗體 0.2ml

LRP15  富含亮氨酸重復(fù)序列LRP15抗體 0.2ml

C17orf53  17號(hào)染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml

B4GALT7/GlcNAc beta  半乳糖轉(zhuǎn)移酶7亞基β1,4抗體 0.2ml

KLHDC9  KLHDC9蛋白抗體 0.2ml

PXMP1/ABCD3  過氧化物酶膜蛋白1抗體 0.2ml

RNF17  環(huán)指蛋白17抗體 0.2ml

APAF1(CT)  凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端） 0.1ml

APPL1  銜接因子蛋白含pH域磷酸酪氨酸結(jié)合域和亮氨酸拉鏈蛋白1抗體 0.1ml

C11orf57  11號(hào)染色體開放閱讀框57抗體 0.2ml

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶ERK抗體鄰溴四唑分子式：225.05分子量： C7H5BrN4英文名稱：Ortho fourCAS號(hào)：73096-42-1

4-羥-4-分子式：177.24分子量： C11H15NO英文名稱：4- hydroxy -4- phenyl PiperidinesCAS號(hào)：40807-61-2

TTC英文名稱：TTCCAS號(hào)：分子式：334.8分子量： C19H15ClN4

4--6-氯嘧分子式：129.55分子量： C4H4ClN3英文名稱：4- amino -6-CAS號(hào)：5305-59-9

2,4,6-三氟三氟甲分子式：200.08分子量： C7H2F6英文名稱：2,4,6- three f three fCAS號(hào)：122030-04-0

9-咔唑分子式：243.31分子量： C18H13N英文名稱：9- phenyl carbazoleCAS號(hào)：1150-62-5

5--2-甲吡分子式：118.14分子量： C7H6N2英文名稱：5- cyano -2- methyl pyridineCAS號(hào)：3222-48-8

蟲螨磷亞砜分子式：377.24分子量： C11H15Cl2O4PS2英文名稱：P and PCAS號(hào)：29185-21-5

圣草次苷英文名稱：Time of StCAS號(hào)：13463-28-0分子式：596.53398分子量：C27H32O15

石吊蘭素英文名稱：NevadensinCAS號(hào)：152743-19-6分子式：344.32分子量：C18H16O7