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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
內(nèi)皮素-1抗體 |
英文名稱(chēng) |
Anti-ET-1 |
貨號(hào) |
BH-K013495 |
英文名稱(chēng) 內(nèi)皮素-1抗體
中文名稱(chēng) 內(nèi)皮素-1抗體
別 名 Endothelin-1; Big endothelin 1; EDN 1; EDN1; EDN1 protein; Endothelin1; ET 1; ET1; OTTHUMP00000039245; PPET1; Preproendothelin 1; Preproendothelin1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 **學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 2.5kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ET-1(CSCSSLMDKECVYFCHLDIIW Disulfide bridges C1-C15, C3-C11)
亞 型 IgG
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類(lèi)別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類(lèi)別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
SORBS2/ArgBP2 精氨酸結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Renin 腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體 0.1ml
GNLY/NKG5 顆粒溶素抗體 0.2ml
M Cadherin M鈣粘附分子抗體 0.1ml
Mitochondrial ribosomal protein L11 線(xiàn)粒體核糖體蛋白L11抗體 0.2ml
IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 0.2ml
Plakophilin 1 橋粒斑菲素蛋白1抗體 0.2ml
IGFBP9/CCN3 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白9 0.1ml
PRUNE/DRES17 乳腺癌相關(guān)蛋白DRES17抗體 0.2ml
POT1 端粒保護(hù)蛋白1抗體 0.2ml
AIFM3 凋亡誘導(dǎo)因子3抗體 0.2ml
Cipar1 前列腺雄抑制信號(hào)蛋白1抗體 0.2ml
ZNF415 鋅指蛋白415抗體 0.2ml
內(nèi)皮素-1抗體5-氯-3-吡分子式:129.54分子量: C5H4ClNO英文名稱(chēng):5- -3- pyridineCAS號(hào):74115-12-1
N-(4-甲酰-3-吡)-2,2-二甲丙酰胺分子式:206.24分子量: C11H14N2O2英文名稱(chēng):N- (4-, -3-) - 2,2- two - methyl acrylateCAS號(hào):127446-35-9
2-喹啉分子式:205.26分子量: C15H11N英文名稱(chēng):2- phenyl groupCAS號(hào):612-96-4
鄰二甲酰分子式:162.15分子量: C8H6N2O2英文名稱(chēng):Ortho phenyl twoCAS號(hào):1445-69-8
間四氮唑分子式:161.16分子量: C7H7N5英文名稱(chēng):間四氮唑CAS號(hào):73732-51-1
4-異喹啉分子式:144.18分子量: C9H8N2英文名稱(chēng):4- amino groupCAS號(hào):23687-25-4
性媒介紅S-80英文名稱(chēng):Acid medium red S-80CAS號(hào):分子式:分子量:
甲硝唑分子式:171.15分子量: C6H9N3O3英文名稱(chēng):MetronidazoleCAS號(hào):443-48-1
雙去氧姜黃素英文名稱(chēng):BisdemethoxycurcuminCAS號(hào):33171-05-0分子式:308.32794分子量:C19H16O4
氯酸鍶分子式:254.52分子量: Cl2O6Sr英文名稱(chēng):Strontium perchlorateCAS號(hào):2151926