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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
雌**受體α抗體(用于western blot) |
英文名稱 |
Anti-ER-Alpha |
貨號 |
BH-K013511 |
英文名稱 雌**受體α抗體(用于western blot)
中文名稱 雌**受體α抗體(用于western blot)
別 名 Estradiol receptor; Estrogen receptor alpha; Estradiol Receptor-alpha; Estrogen Receptor 1; Atherosclerosis, susceptibility to, included; DKFZp686N23123; ER Alpha; ER; ER-alpha; ERalpha; ER[a]; Era; ESR; ESR1; ESR1_HUMAN; ESR2; ESRA; Estr; Estrogen receptor 1 (alpha); Estrogen resistance, included; HDL cholesterol, augmented response of, to hormone replacement, included; Myocardial infarction, susceptibility to, included; NR3A1; Nuclear receptor subfamily 3 group A member 1; OTTHUMP00000017718; OTTHUMP00000017719; RNESTROR.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) ***病 腫瘤細胞生物標志物 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 66kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ER-Alpha C-terminus
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Agrin 聚集蛋白抗體 0.1ml
SMOC2 分泌模塊化鈣結(jié)合蛋白2抗體(平滑肌相關(guān)蛋白2) 0.2ml
Importin4/RanBP4 核蛋白4抗體(Ran結(jié)合蛋白4) 0.2ml
MOBKL2C Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體 0.2ml
CCDC83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體 0.2ml
FRMD8 FRMD8蛋白抗體 0.2ml
UBE2D2 泛素蛋白連接酶D2抗體 0.2ml
RCAN2/DSCR1L1 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白2抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1) 0.1ml
CYFIP2 細胞質(zhì)脆性X智力低下蛋白結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
AMPK gamma 3/PRKAG3 腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體 0.2ml
OGFOD1 末端多聚腺苷酸1蛋白抗體 0.2ml
phospho-GluR1(Ser836) 磷酸化谷氨酸受體1抗體 0.1ml
ox-LDL 氧化低密度脂蛋白抗體 0.1ml
雌**受體α抗體(用于western blot)4,4'-雙(5-己-2-噻吩)-2,2'-聯(lián)吡分子式:488.75分子量: C30H36N2S2英文名稱:4,4'- (double 5- hexyl -2- thienyl) -2,2'- bipyridineCAS號:1047684-56-9
2-丙咪唑分子式:110.16分子量: C6H10N2英文名稱:2- groupCAS號:50995-95-4
文多靈英文名稱:Wen DuolingCAS號:2182-14-1分子式:456.53138分子量:C25H32N2O6
4,4'-雙(4-氧)聯(lián)分子式:368.43分子量: C24H20N2O2英文名稱:4,4'- bis (4- amino group)CAS號:13080-85-8
1-(3-氯丙氧)-4-氟分子式:分子量: C9H10ClFO3英文名稱:1- (3- chlorine propoxy) - -4-CAS號:1716-42-3
3-溴吡-N-氧物分子式:174分子量: C5H4BrNO英文名稱:3- -N- oxideCAS號:2402-97-3
氟硅酸鉀分子式:220.27分子量: K2SiF6英文名稱:Potassium fluorideCAS號:16871-90-2
對氟甲砜分子式:174.19分子量: C7H7FO2S英文名稱:P-fluorophenyl methylsulfonesCAS號:455-15-2
2-溴-5-吡分子式:173.01分子量: C5H5BrN2英文名稱:2- -5- amino pyridineCAS號:13534-97-9
對氯碘分子式:238.45分子量: C6H4ClI英文名稱:The chlorine iodobenzeneCAS號:637-87-6