抗體的種類：

抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的，體液性抗體由B淋細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對D的功能了解較少。

（1） IgG：是血清中濃度大的一類球蛋白，約占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后，其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中，參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。

（2） IgM：由5個球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內(nèi)大的球蛋白?？乖醮未碳C體后，IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內(nèi)，可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免作用很強，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時間短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中，參與凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)。

（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結(jié)構(gòu)，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在**表面，當與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。

別    名   GCNF 1; GCNF; GCNF1; Germ cell nuclear factor; hGCNF; hRTR; NR 61; NR61; NR6A1; NR6A1_HUMAN; Nuclear receptor subfamily 6 group A member 1; Orphan nuclear receptor NR6A1; Retinoic acid receptor related testis associated receptor; Retinoid receptor related testis specific receptor; Retinoid receptor-related testis-specific receptor; RTR.
英文名稱  Anti-GCNF

中文名稱  生殖細胞核因子GCNF/維甲酸受體相關(guān)睪丸受體抗體

濃    度  1mg/1ml

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域  細胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué) 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 54kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human GCNF (251-350aa)

亞    型  IgG 

本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體反應(yīng)特點：

1.高度特異性，特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征，特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合；

2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為：Ag+AbAg·Ab；

3.適當濃度和比例；

4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時，化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml，定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。

抗體反應(yīng)的因素：

1.電解質(zhì) ：抗原抗體特異結(jié)合后，膠體粒便可發(fā)生脫水作用，此時易受電解質(zhì)影響，如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚，于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。

實驗步驟：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復(fù)，在此步驟后進行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進行復(fù)染，脫水，透明。

14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

Hce-8693(人盲腸腺細胞(未分化))蘇云金芽胞桿湯普遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. thompsoni

冬蟲夏草 Cordyceps sinensisMPC-11(小鼠漿細胞瘤)

植物桿 Lactobacillus plantarum酸球亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

銀耳 Tremella fuciformis液化沙雷氏 Serratia liquefaciens

枯草芽胞桿 Bacillus subtilis香菇 Lentinula edodes

K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞)MCF全細胞裂解液

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黃灰青霉 Penicillium aurantiogriseum

豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna人腺細胞

地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)

戊糖桿 Lactobacillus pentosus植物桿 Lactobacillus plantarum

百脈根根瘤 Rhizobium loti大孢綠僵=金龜子綠僵大孢變種 Metarhizium majarosporae= anisopliae var. majus

大鼠肝細胞人內(nèi)膜上皮細胞完全培養(yǎng)基

U-2 OS, 人骨肉瘤細胞黑木耳 Auricularia auricula

生殖細胞核因子GCNF/維甲酸受體相關(guān)睪丸受體抗體蓮心堿高氯酸鹽  英文名稱：Liensinine perchlorate   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

羊藿素  英文名稱：Icaritin   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

表兒茶素  英文名稱：Epicatechin   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

L-羥脯氨酸  英文名稱：L- hydroxyproline   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

吉馬酮  英文名稱：Germacrone   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

異鼠李素-3-O-葡萄糖苷  英文名稱：Isorhamnetin -3-O- glucoside   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

異甘草素  英文名稱：Isoliquiritigenin   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

新橙皮苷二氫查爾酮  英文名稱：New hesperidin chalcone two hydrogen   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

木通苯乙醇苷B、荷苞花苷B  英文名稱：Calceolarioside B, Hebao linarin B   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 10mg/支

硫酸長春新堿  英文名稱：Vincristine sulfate   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

腐胺  英文名稱：Putrescine   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

甘草查爾酮C  英文名稱：Licochalcone C   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支