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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體 |
英文名稱 |
Anti-Gli2 |
貨號(hào) |
BH-K013941 |
英文名稱 轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體
中文名稱 轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體
別 名 Gli 2; Gli-2; GLI family zinc finger 2; GLI kruppel family member 2; GLI Kruppel family member GLI2; GLI2; GLI2_HUMAN; Oncogene GLI2; Tax helper protein 2; Tax helper protein; Tax responsive element 2 holding protein; Tax responsive element 25 bp sequence binding protein; THP 2; THP; THP2; Zinc finger protein GLI2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 鋅指蛋白 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 168kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Gli2 (501-600aa)
亞 型 IgG
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
植物桿 Lactobacillus Plantarum大鼠腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞)H4-II-E-C3(大鼠肝細(xì)胞 )
薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis
人成骨肉瘤細(xì)胞雙環(huán)林地菇 Agaricus placomyces
鮮綠青霉 Penicillium viridicatum大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
L6(大鼠成肌細(xì)胞)U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti球孢白僵 Beauveria bassiana
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞KATO III(人胃細(xì)胞)
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基THP-1人單核白血病細(xì)胞
人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基土曲霉 Aspergillus terreus
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti苜蓿中華根瘤
293A,人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級(jí)別)大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
胰酶細(xì)胞消化液MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體2,6-二甲基酚 英文名稱:2, 6- two methyl phenol 保存:-20℃ 規(guī)格:50mg
6-甲氧基-2-萘乙酮 英文名稱:6- methoxy -2- acetonaphthone 保存:-20℃ 規(guī)格:50mg
硝基呋喃丙烯酸 英文名稱:Nitro furan acrylic acid 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
甲磺酸雙氫麥角毒堿 英文名稱:Dihydroergotoxine methanesulfonate 保存:-20℃ 規(guī)格:500mg
安石榴苷、安石榴甙 英文名稱:Ashmore eclogite glycosides, punicalagin 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
芥堿硫氰酸鹽 英文名稱:Sinapine thiocyanate 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
黃腐酚 英文名稱:Xanthohumol 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
瓜子金皂苷己 英文名稱:Polygalasaponin oneself 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
澤瀉醇A-24-醋酸酯;澤瀉醇A醋酸酯 英文名稱:Alisol A-24- acetate Alisol A acetate; 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
新補(bǔ)骨脂異黃酮 英文名稱:Neobavaisoflavone 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
酮麝香 英文名稱:Musk ketone 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
白花前胡丁素 英文名稱:White Qian Hu Dingsu 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支