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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 |
英文名稱 |
Anti-GPRIN1 |
貨號 |
BH-K014011 |
英文名稱 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體
中文名稱 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體
別 名 G protein regulated inducer of neurite outgrowth 1; GRIN1; KIAA1893; Z16; GRIN1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 **學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 102kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human GPRIN1 (131-170aa)
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
人氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基紫紅曲霉 Monascus purpureus
百脈根根瘤 Rhizobium loti酸球脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris
植物桿 Lactobacillus plantarum酒假絲酵母 Candida kefyr
Ampicillin(100mg/ml,1000X)鬼傘屬 Bradyrhizobium vigna
桿 Lactobacillus sp.三葉草根瘤 Rhizobium trifolii
正常細(xì)胞一步法Western專用封閉液
豹皮香菇 Lentinus lepideusP19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)
負(fù)鼠腎細(xì)胞香菇 Lentinula edodes
猴釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)凍膠假絲酵母 Candida gelida
人十二指腸腺細(xì)胞苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
粗狀假絲酵母 Candida valida不動桿 Acinetobacter sp.
臘狀芽胞桿 Bacillus cereusSaos-2(人骨肉瘤細(xì)胞)
G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體小鼠胰腺導(dǎo)管上細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠支氣管成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
SW1116(人結(jié)腸腺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BC-009(人腺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人大細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H661
NCI-H524(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
M14(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人腺上細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
沙氏BHI瓊脂/沙氏腦心浸液瓊脂/Sabouraud BHI Agar真檢測 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
LA795(小鼠肺腺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人腺細(xì)胞英文名稱:MCF-7
HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2