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抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。
別 名 Cartilage matrix protein; CMP; CRTM; Mat1; MATN1; Matrilin-1; MGC95132; Cartilage matrix protein 1
英文名稱 Anti-Matrilin 1
中文名稱 軟骨基質(zhì)蛋白抗體
濃 度 1mg/1ml
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 **學(xué) 發(fā)育生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 55kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Matrilin 1 C-terminus
亞 型 IgG
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測(cè)定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來(lái)水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對(duì)疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對(duì)D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時(shí)間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬(wàn)~18萬(wàn),可以通過(guò)兔的胎盤,但不能通過(guò)豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。
(2) IgM:由5個(gè)球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量?jī)H次于IgG,分子量90萬(wàn),是體內(nèi)大的球蛋白??乖醮未碳C(jī)體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量?jī)H次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過(guò)激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強(qiáng),是IgG的100倍,但由于含量?jī)H為IgG的1/10,且持續(xù)時(shí)間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中,參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬(wàn),亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生,分子量40萬(wàn),含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結(jié)構(gòu),分子量19萬(wàn),由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過(guò)敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無(wú)作用。
CXC趨化因子受體7(CXCR7)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CXCR7 ELISA Kit,英文縮寫:CXCR7,產(chǎn)品別名:CXC趨化因子受體7(CXCR7)ELISA檢測(cè)試劑盒,CXC趨化因子受體7(CXCR7)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:PⅢNP ELISA Kit,英文縮寫:PⅢNP,產(chǎn)品別名:Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)ELISA檢測(cè)試劑盒,Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CREB ELISA Kit,英文縮寫:CREB,產(chǎn)品別名:cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA檢測(cè)試劑盒,cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
5核苷酸酶(5-NT)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:5-NT ELISA Kit,英文縮寫:5-NT,產(chǎn)品別名:5核苷酸酶(5-NT)ELISA檢測(cè)試劑盒,5核苷酸酶(5-NT)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:GDNF ELISA Kit,英文縮寫:GDNF,產(chǎn)品別名:質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA檢測(cè)試劑盒,質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
巨集落刺激因子(GM-CSF)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:GM-CSF ELISA Kit,英文縮寫:GM-CSF,產(chǎn)品別名:巨集落刺激因子(GM-CSF)ELISA檢測(cè)試劑盒,巨集落刺激因子(GM-CSF)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
白介素17(IL-17)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:IL-17 ELISA Kit,英文縮寫:IL-17,產(chǎn)品別名:白介素17(IL-17)ELISA檢測(cè)試劑盒,白介素17(IL-17)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
組蛋白乙?;D(zhuǎn)移酶1(HAT1)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:HAT1 ELISA Kit,英文縮寫:HAT1,產(chǎn)品別名:組蛋白乙?;D(zhuǎn)移酶1(HAT1)ELISA檢測(cè)試劑盒,組蛋白乙?;D(zhuǎn)移酶1(HAT1)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
轉(zhuǎn)錄銜接因子3(TADA3)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:TADA3 ELISA Kit,英文縮寫:TADA3,產(chǎn)品別名:轉(zhuǎn)錄銜接因子3(TADA3)ELISA檢測(cè)試劑盒,轉(zhuǎn)錄銜接因子3(TADA3)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
周期素依賴性激酶7(CDK7)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:CDK7 ELISA Kit,英文縮寫:CDK7,產(chǎn)品別名:周期素依賴性激酶7(CDK7)ELISA檢測(cè)試劑盒,周期素依賴性激酶7(CDK7)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白15(LCN15)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:LCN15 ELISA Kit,英文縮寫:LCN15,產(chǎn)品別名:脂質(zhì)運(yùn)載蛋白15(LCN15)ELISA檢測(cè)試劑盒,脂質(zhì)運(yùn)載蛋白15(LCN15)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
產(chǎn)毒培養(yǎng)基 250(g)
蛋白胨水(PW) 250(g)
M17瓊脂 100(g)
膽硫乳瓊脂(DHL) 250(g)
凍干血漿 0.5mL/支×10(g)
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ) 250(g)
葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 250(g)
軟骨基質(zhì)蛋白抗體(1-氯-2-甲酰乙)二茂鐵分子式:274.527CAS號(hào):12085-68-6分子量: C8H6ClO.C5H5.Fe
1-氯丙英文名稱:1- Cl分子量:CAS號(hào):
1-溴-3-(五氟磺酰)分子式:283.06CAS號(hào):672-30-0分子量: C6H4BrF5S
氟鈷分子式:168.99CAS號(hào):13817-37-3分子量: CoF2H8O4
2-(3-溴)萘分子式:283CAS號(hào):667940-23-0分子量: C16H11Br
亞硝酸鉀分子式:85.1CAS號(hào):7758-09-0分子量: KNO2
迷迭香英文名稱:Rosemary acid分子量:C18H16O8CAS號(hào):20283-92-5
4-(4-溴胺)聯(lián)分子式:324.22CAS號(hào):1160294-93-8分子量: C18H14BrN
2-溴-6-甲氧萘分子式:237.09CAS號(hào):5111-65-9分子量: C11H9BrO
Z907染料鈉鹽英文名稱:Dye sodium salt 907分子量: C42H51N6NaO4RuS2CAS號(hào):871466-65-8