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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
磷酸化蛋白激酶B2抗體 |
英文名稱 |
Anti-phospho-AKT2(Ser474) |
貨號 |
BH-K015995 |
英文名稱 Anti-phospho-AKT2(Ser474)
中文名稱 磷酸化蛋白激酶B2抗體
別 名 AKT2 (phospho S474); p-AKT2 (phospho S474); Akt2(Phospho-Ser474); C AKT; MGC9965; Oncogene AKT1; PKB; PRKBA; Protein Kinase B Alpha; RAC Alpha; RAC; RAC PK Alpha; RAC Serine/Threonine Protein Kinase; vAKT Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 **學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human AKT2 around the phosphorylation site of Ser474
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
α半乳糖苷酶(αGAL)elisa檢測試劑盒英文名稱:αGAL ELISA Kit,英文縮寫:αGAL,產(chǎn)品別名:α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA檢測試劑盒,α半乳糖苷酶(αGAL)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
P53(P53)elisa檢測試劑盒英文名稱:P53 ELISA Kit,英文縮寫:P53,產(chǎn)品別名:P53(P53)ELISA檢測試劑盒,P53(P53)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)elisa檢測試劑盒英文名稱:TARDBP/TDP43 ELISA Kit,英文縮寫:TARDBP/TDP43,產(chǎn)品別名:TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)ELISA檢測試劑盒,TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
GDP解離抑制因子2(GdI2)elisa檢測試劑盒英文名稱:GdI2 ELISA Kit,英文縮寫:GdI2,產(chǎn)品別名:GDP解離抑制因子2(GdI2)ELISA檢測試劑盒,GDP解離抑制因子2(GdI2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
CD68分子(CD68)elisa檢測試劑盒英文名稱:CD68 ELISA Kit,英文縮寫:CD68,產(chǎn)品別名:CD68分子(CD68)ELISA檢測試劑盒,CD68分子(CD68)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
B活化因子(BAFF)elisa檢測試劑盒英文名稱:BAFF ELISA Kit,英文縮寫:BAFF,產(chǎn)品別名:B活化因子(BAFF)ELISA檢測試劑盒,B活化因子(BAFF)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)elisa檢測試劑盒英文名稱:PⅠCP ELISA Kit,英文縮寫:PⅠCP,產(chǎn)品別名:Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)ELISA檢測試劑盒,Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
25羥基維生素D2(25 HVD2)elisa檢測試劑盒英文名稱:25 HVD2 ELISA Kit,英文縮寫:25 HVD2,產(chǎn)品別名:25羥基維生素D2(25 HVD2)ELISA檢測試劑盒,25羥基維生素D2(25 HVD2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
血小板內(nèi)皮粘附分子1(PECAM1)elisa檢測試劑盒英文名稱:PECAM1 ELISA Kit,英文縮寫:PECAM1,產(chǎn)品別名:血小板內(nèi)皮粘附分子1(PECAM1)ELISA檢測試劑盒,血小板內(nèi)皮粘附分子1(PECAM1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
次級組織趨化因子6Ckine(CCL21)elisa檢測試劑盒英文名稱:CCL21 ELISA Kit,英文縮寫:CCL21,產(chǎn)品別名:次級組織趨化因子6Ckine(CCL21)ELISA檢測試劑盒,次級組織趨化因子6Ckine(CCL21)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
γ干擾素誘導單核因子(MIG/CXCL9)elisa檢測試劑盒英文名稱:MIG/CXCL9 ELISA Kit,英文縮寫:MIG/CXCL9,產(chǎn)品別名:γ干擾素誘導單核因子(MIG/CXCL9)ELISA檢測試劑盒,γ干擾素誘導單核因子(MIG/CXCL9)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運蛋白PMAT抗體
磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體
信號感應增殖相關(guān)蛋白1抗體
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體
表面糖蛋白Trop2抗體(胰腺癌標志物蛋白)
Tau微管蛋白激酶2抗體
轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
四分子交聯(lián)體2抗體(四旋蛋白)
血小板**素受體抗體
血栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)
生精凋亡相關(guān)基因4抗體
磷酸化蛋白激酶B2抗體阿達帕林(標準品)Acetyl CoA trilithium salt,≥93%1MG通用試劑
阿德福韋2,4Dimethyl1Hpyrrole,97%1G通用試劑
阿德福韋(標準品)Ethyl oxamate,98%25G通用試劑
阿爾法骨4Amino1naphthalenesulfonic acid sod...25G通用試劑
PS48βSitosteryl acetate,97%10MG通用試劑
鋅Tranexamic acid,97%5G標準品
辛(標準品)4Phenylbutyric acid,99%5G標準品
鹽氨索Matrine (HPLC,≥98%)5G標準品
鹽氨索(標準品)3,5Dimethylpyrrole2carboxaldehyde,95%1G通用試劑
氨?。ㄈ㏕PPTS,≥95.0%250MG通用試劑
桿菌肽Vanillic acid,≥97.0%25G通用試劑
鹽阿米替林Thiabendazole,98%25G通用試劑
磺氨氯地平(絡活喜、安洛地)Hymexazol,97%5G通用試劑
磺氨氯地平(標準品)Prohexadione calcium,90%5G通用試劑
鹽阿莫羅芬/鹽阿莫洛芬 Glyphosine,≥98.0%5G通用試劑