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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體 |
英文名稱 |
Anti-phospho-ATG4D(Ser467) |
貨號(hào) |
BH-K016211 |
英文名稱 Anti-phospho-ATG4D(Ser467)
中文名稱 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體
別 名 APG4 D; APG4D; ATG4 autophagy related 4 homolog D; Atg4dl; AUT like 4 cysteine endopeptidase; AUTL4; Autophagin 4; Autophagy related cysteine endopeptidase 4; Autophagy related protein 4 homolog D; Cysteine protease ATG4D.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ATG4D around the phosphorylation site of Ser467 [RP(p-S)SE]
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:MMP25 ELISA Kit,英文縮寫:MMP25,產(chǎn)品別名:基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)ELISA檢測(cè)試劑盒,基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
核黃素激酶(RFK)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:RFK ELISA Kit,英文縮寫:RFK,產(chǎn)品別名:核黃素激酶(RFK)ELISA檢測(cè)試劑盒,核黃素激酶(RFK)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
黃體**素(LH)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:LH ELISA Kit,英文縮寫:LH,產(chǎn)品別名:黃體**素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒,黃體**素(LH)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
骨橋素(OPN)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:OPN ELISA Kit,英文縮寫:OPN,產(chǎn)品別名:骨橋素(OPN)ELISA檢測(cè)試劑盒,骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
高敏甲狀腺素(u-T4)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:u-T4 ELISA Kit,英文縮寫:u-T4,產(chǎn)品別名:高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測(cè)試劑盒,高敏甲狀腺素(u-T4)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
甘露糖(Mannose)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:Mannose ELISA Kit,英文縮寫:Mannose,產(chǎn)品別名:甘露糖(Mannose)ELISA檢測(cè)試劑盒,甘露糖(Mannose)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
肺炎衣原體抗原(Cpn)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:Cpn ELISA Kit,英文縮寫:Cpn,產(chǎn)品別名:肺炎衣原體抗原(Cpn)ELISA檢測(cè)試劑盒,肺炎衣原體抗原(Cpn)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
多效生長(zhǎng)因子(PTN)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:PTN ELISA Kit,英文縮寫:PTN,產(chǎn)品別名:多效生長(zhǎng)因子(PTN)ELISA檢測(cè)試劑盒,多效生長(zhǎng)因子(PTN)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:FⅧAg ELISA Kit,英文縮寫:FⅧAg,產(chǎn)品別名:第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測(cè)試劑盒,第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
蛋白S(ProteinS)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:ProteinS ELISA Kit,英文縮寫:ProteinS,產(chǎn)品別名:蛋白S(ProteinS)ELISA檢測(cè)試劑盒,蛋白S(ProteinS)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
催產(chǎn)素受體(OXTR)elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱:OXTR ELISA Kit,英文縮寫:OXTR,產(chǎn)品別名:催產(chǎn)素受體(OXTR)ELISA檢測(cè)試劑盒,催產(chǎn)素受體(OXTR)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
神經(jīng)***轉(zhuǎn)化酶2抗體
GSK3B相互作用蛋白抗體
軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體
磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體
富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5抗體
醌氧化還原酶抗體
嗅球蛋白3抗體
卵巢癌相關(guān)基因2蛋白抗體
蛋白激酶C zeta 抗體
磷酸化蛋白激酶C nu型抗體
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體替卡西林(標(biāo)準(zhǔn)品)3Methylthiophene25ML多肽試劑
RGD肽2Methylthiophene ,≥98%25G多肽試劑
肝素2Chlorothiophene,>96.0%25G多肽試劑
促胰液素;胰泌素2,5Dibromothiophene ,≥96.0%10G多肽試劑
麝香草Dibenzothiophene, ≥99.0%1G多肽試劑
普拉洛芬2Hexylthiophene ,≥97%1G多肽試劑
普拉洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)4,6Dimethyldibenzothiophene, ≥99.0%250MG多肽試劑
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五2Acetylthiophene,≥99.0%25G多肽試劑
啶;啶2Acetyl5bromothiophene,≥99.0%5G多肽試劑
糖原,α1,6 葡聚糖,糖元3,4Ethylenedioxythiophene ,≥97.0%5G多肽