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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
絲/蘇氨酸蛋白激酶II β抗體(casein kinase IIβ) |
英文名稱 |
Anti-CKIIbeta |
貨號 |
BH-K016635 |
英文名稱 Anti-CKIIbeta
中文名稱 絲/蘇氨酸蛋白激酶II β抗體(casein kinase IIβ)
別 名 Casein kinase 2 beta polypeptide; casein kinase IIβ; Casein kinase II subunit beta; CK II beta; CK2B; CK2N; CSK2B; CSK2B_HUMAN; CSNK 2B; CSNK2B; G5A; MGC138222; MGC138224; Phosvitin; Protein G5a.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 干細胞 細胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 25kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK II alpha beta
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
白分化抗原CD2AP 規(guī)格: 0.5mg CD2AP (CD2-associated protein)
毒蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗原 規(guī)格: 0.5mg ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor)
心肌肌鈣蛋白 規(guī)格: 0.5mg CTn1 (cardiac troponin 1)
嗜酸性粒陽離子蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat
FOS樣抗原2 規(guī)格: 0.5mg FRA2/FOSL2(Fos related/like antigen 2)
谷胱甘肽還原酶抗原 規(guī)格: 0.5mg GSR/GRase(glutathione reductase)
抑制素α抗原 規(guī)格: 0.5mg Inhibin Alpha
人類狀瘤病毒16抗原 規(guī)格: 0.5mg HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16)
整合素alpha E2抗原 規(guī)格: 0.5mg Integrin alpha E2 peptide
核小體組裝蛋白1(多肽) 規(guī)格: 0.5mg NAP1 (nucleosome assembly protein 1)
絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原 規(guī)格: 0.5mg MKK3(MAP Kinase Kinase 3)
Hs 578T(人腺)5×106cells/瓶×2
293FT(人胚腎)5×106cells/瓶×2
種培養(yǎng)基/Strain Medium(For B.Cerus)四環(huán)素檢測中蠟樣芽孢桿的培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
人高分胃英文名稱:NCI-N87
ACHN(人腎)5×106cells/瓶×2
T84(人結(jié)腸腺肺轉(zhuǎn)移)5×106cells/瓶×2
麥角甾苷規(guī)格:20mg/支;98%
大鼠腎英文名稱:NRK-52E
COLO 201(人結(jié)直腸腺)5×106cells/瓶×2
RM1(大鼠肌肉成纖維樣)5×106cells/瓶×2
絲/蘇氨酸蛋白激酶II β抗體(casein kinase IIβ)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2Chloro5fluoropyridine,95%
質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR2Chloro3fluoropyridine,97%
質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR3Bromo5fluoropyridine,97%
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR4Bromo2chloropyridine,97%
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR3Bromo2chloropyridine,98%
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2Bromo5chloropyridine,98%
質(zhì)量規(guī)格:>60%,BS5Bromo2chloro3picoline,98%
質(zhì)量規(guī)格:>70%,BS3Amino2methoxypyridine,98%
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2Amino3bromo5chloropyridine,97%
質(zhì)量規(guī)格:工業(yè)級3Amino5bromo2chloropyridine,97%
質(zhì)量規(guī)格:>95%,PractGrade5Bromo2chloro3nitropyridine,97%
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR(R)5(Bromomethyl)2pyrrolidinone,96%
質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR3Methoxy2nitropyridine,98%
質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR2,3Cyclopentenopyridine,98%
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2,4Dithiopyrimidine,98%