別    名   2010301N04Rik; AI452191; Aplf; APLF_HUMAN; Aprataxin and pnk-like factor; Apurinic-apyrimidinic endonuclease APLF; C2orf13; PNK and APTX like FHA protein; PNK and APTX-like FHA domain-containing protein; RGD1565557; XIP1; XRCC1 interacting protein 1; XRCC1-interacting protein 1.
英文名稱  Anti-APLF

中文名稱  DNA修復(fù)酶相互作用蛋白抗體

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 表觀遺傳學(xué)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 57kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human APLF

產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500

亞    型  IgG

本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。

抗體的熒光標(biāo)記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體反應(yīng)特點(diǎn)：

1.高度特異性，特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征，特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合；

2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為：Ag+AbAg·Ab；

3.適當(dāng)濃度和比例；

4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí)，化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml，定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。

抗體反應(yīng)的因素：

1.電解質(zhì) ：抗原抗體特異結(jié)合后，膠體粒便可發(fā)生脫水作用，此時(shí)易受電解質(zhì)影響，如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚，于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復(fù)，在此步驟后進(jìn)行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍(lán)色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。

14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

熒光素標(biāo)記酸性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-RPLP0/FITC

熒光素標(biāo)記性結(jié)合球蛋白抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-SHBG /FITC

熒光素標(biāo)記磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC

熒光素標(biāo)記睪丸精子發(fā)生相關(guān)基因5抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-SRG5/SPATA12/FITC

熒光素標(biāo)記核突觸蛋白-γ抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti- Gamma-Synuclein/SNCG /FITC

熒光素標(biāo)記CD72抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-CD72/Ly-32/FITC

熒光素標(biāo)記磷酸化酪氨酸激酶A抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC

膠體金離子標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體 規(guī)格：  0.2ml  Anti-TNF- Alpha /Gold

熒光素標(biāo)記非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-TNK1/FITC

生物素化CD14抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-CD14/Biotin

熒光素標(biāo)記WEE1蛋白抗體IgG 規(guī)格：  0.2ml  Anti-WEE1 protein/FITC

人結(jié)直腸腺英文名稱：Caco-2

Glutathione-Triethyleneglycocyl-Sepharose 6B/GST瓊脂糖凝膠2ml、10ml國產(chǎn)

MA-782(小鼠腺)5×106cells/瓶×2

牛膽鹽/Bile salt from oxBR，60%25克國產(chǎn)/進(jìn)口

多價(jià)蛋白胨-酵母膏培養(yǎng)基/PY培養(yǎng)基/PY Medium產(chǎn)氣莢膜梭的培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

小鼠視網(wǎng)膜色素上完全培養(yǎng)基100mL

大鼠腸上完全培養(yǎng)基100mL

HMy2.CIR(人B母)5×106cells/瓶×2

黑大家鼠肺成纖維樣英文名稱：NRL1

AtT-20(小鼠垂體瘤)5×106cells/瓶×2

DNA修復(fù)酶相互作用蛋白抗體質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品3AminocrotonicAcidMethylEster,97%

質(zhì)量規(guī)格：>98%,EGFR抑制劑Methyl4cyanobenzoate,99%

質(zhì)量規(guī)格：>98%,EGFR抑制劑Methyl6quinoxalinecarboxylate,97%

質(zhì)量規(guī)格：BR,效價(jià)>900IU/MGMethyl3,3Dimethylacrylate,97%

質(zhì)量規(guī)格：assay12%~24%EthylThiooxamate,95%

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ethyl2Bromothiazole4carboxylate,96%

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品DimethylL()Malate,98%

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品MethylNitroacetate,98%

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，對(duì)照品3AminocrotonicAcidMethylEster,97%

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Methyl4cyanobenzoate,99%

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Methyl6quinoxalinecarboxylate,97%

質(zhì)量規(guī)格：50%grade3,3DiethoxypropionicAcidEthylEster...

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品αMethyleneγbutyrolactone,≥97.0%

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品2Ethylhexyl2cyano3,3diphenylacryl...

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品4FluorobenzoicAcidMethylEster,98%

抗體的種類：

抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的，體液性抗體由B淋細(xì)胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對(duì)疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對(duì)D的功能了解較少。

（1） IgG：是血清中濃度大的一類球蛋白，約占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機(jī)體受到抗原初次刺激后，其產(chǎn)生時(shí)間僅次于IgM。在抗體介導(dǎo)的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中，參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。

（2） IgM：由5個(gè)球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內(nèi)大的球蛋白?？乖醮未碳C(jī)體后，IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內(nèi)，可以通過激活補(bǔ)體發(fā)揮溶菌、溶細(xì)胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免作用很強(qiáng)，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時(shí)間短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學(xué)反應(yīng)中，參與凝集反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。

（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細(xì)胞產(chǎn)生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結(jié)構(gòu)，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細(xì)胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在**表面，當(dāng)與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機(jī)體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。