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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
活性蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA等 |
動(dòng)物細(xì)胞/組織 |
2-8℃ |
BH-D85218 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
尾加壓素Ⅱ 48T/96T
小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
生長(zhǎng)結(jié)合蛋白 48T/96T
兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1γ 48T/96T
大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
活性蛋白提取試劑盒內(nèi)收蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Adducin protein
磷酸化間變型瘤激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-ALK/CD246(Tyr1586)
銜接蛋白γ抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Gamma-Adaptin
激活素受體2B抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-ARIP2B
有絲分裂激酶A/B/C抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Aurora A/B/C
凋亡抑制因子5抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-BIRC5/Survivin variant
磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-Caspase-9 (Try153)
補(bǔ)體C3抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-human C3
巨噬炎性蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CCL23/MIP3
NK抑制性受體2DL3抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD158b2
CD8抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-CD8
牛外周血分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
Picroside III 胡黃連苷III 64461-95-6 10mg
Cyanidin-3-O-Arabinoside 矢車菊素-3-O-阿拉伯糖苷 111613-04-8 1mg
Gypenoside XLVI 絞股藍(lán)皂苷XLVI 94705-70-1 20mg
Colchicine 秋水仙堿 64-86-8 20mg
Neoagarotetraose 新瓊四糖 16033-31-1 10mg
Adenine 腺嘌呤 73-24-5 50mg
Cysteamine hydrochloride 半胱胺鹽酸鹽 156-57-0 20mg
PCR板(半裙邊)(0.2ml) 96孔 塊
Hippuric acid 馬尿酸 25g 瓶