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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
核蛋白和胞漿蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
動(dòng)物細(xì)胞/組織 |
2-8℃ |
BH-D85224 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腎病蛋白(nephrin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人分泌成分(SC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
卵清蛋白特異性IgG 48T/96T
豬脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠CD163分子(CD163) Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠生長(zhǎng)(GH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人TATA盒結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肝糖原磷酸化酶 48T/96T
核蛋白和胞漿蛋白提取試劑盒熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體2B(5-HT/serotonin R2B)抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-5-HTR2B/FITC
熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Ack1/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-Afadin(Ser1718) /FITC
熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白-2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Annexin II/FITC
熒光素標(biāo)記α1腎上腺素能受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-AR Alpha1/FITC
熒光素標(biāo)記ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine)
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Bcl-10抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Bcl-10(phospho Ser218)/FITC
熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Caspase-6 (NT)/FITC
熒光素標(biāo)記巨噬炎癥蛋白-1γ抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC
熒光素標(biāo)記氨肽酶N抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD13/FITC
4-Hydroxyphenylacetic acid 對(duì)羥基乙酸 156-38-7 20mg
50ml離心管(圓底螺口) 50支 包
Epalrestat 依帕司他 82159-09-9 20mg
磁力攪拌子 10mm 只
Alizarin Fluorine Blue 茜素絡(luò)合指示劑 5g 瓶
Sclareol 香紫蘇醇 515-03-7 20mg
Schizandrin A 五味子甲素 61281-38-7 20mg
Schisandrol B 五味子醇乙 58546-54-6 20mg
Schisandrin C 五味子丙素 61301-33-5 20mg
Sanguinarine 血根堿 2447-54-3 20mg