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自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
細胞核蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
動物細胞 |
2-8℃ |
BH-D85228 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
丙二醛 48T/96T
維生素A 48T/96T
人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬內(nèi)皮素1(ET-1)Elisa 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
傳染性單核細胞增多型IgD 48T/96T
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肝素相關抗體 48T/96T
人結(jié)蛋白(Des)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細胞核蛋白提取試劑盒 熒光素PE標記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NF-L/PE
熒光素標記一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS /FITC
熒光素標記磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342) /FITC
熒光素標記兔抗抑癌基因p16抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-P16/FITC
熒光素標記抗血小板活化因子受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PAFR/FITC
熒光素標記蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml anti-PDI/FITC
熒光素標記磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) /FITC
熒光素標記抗磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-P53(pSer392)/FITC
熒光素標記神經(jīng)叢蛋白A1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Plexin A1/Plexin 1/FITC
辣根過氧化物酶標記抗三聚氰胺抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Melamine/HRP
熒光素標記Rbms3 protein抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Rbms3 protein/FITC
DL-Malic acid DL-蘋果酸 25g 瓶
Ethidium Brmide 溴化乙錠 (EB) 100mg 支
Solar Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680) 5 mg 支
SOD 超氧化物岐化酶(來源牛紅) 15KU 瓶
L-Arginine HCL L-精氨酸鹽酸鹽 25g 瓶
通用引物1492R (10uM) 250ul 支
SABC(兔IgG)-POD kit 100-200T 盒
豚鼠IgG干粉 10mg 支
Coomassie brilliant blue G-250 考馬斯亮藍G-250 5g 瓶
馬外周血分離液試劑盒 200ml/KIT 盒