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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
核膜蛋白和核內(nèi)蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 動(dòng)物細(xì)胞/組織 |
|
2-8℃ |
BH-D85230 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人氫化可的松(HYD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠維生素B6(VB6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
核膜蛋白和核內(nèi)蛋白提取試劑盒生物素化鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測(cè))IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CEA/Biotin
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml Rabbit Anti-Guinea IgG/HRP
生物素化兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.3ml Rabbit Anti-horse IgM/Biotin
熒光素標(biāo)記兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.3ml Rabbit Anti- guinea pig IgM/FITC
金標(biāo)記兔抗牛IgM (10或15nm) 規(guī)格: 2ml Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold
(親和層析純化) 規(guī)格: 1mg Rabbit Anti-chicken IgM
兔抗豚鼠IgG抗血清 規(guī)格: 1ml Rabbit Anti-Guinea IgG Whole serum
(親和純化)人IgM 規(guī)格: 1mg human IgM
突變型β淀粉樣肽1-40 規(guī)格: 0.1mg A Beta1-40 (mutation type, MT) peptide
蛋白酶激活受體-2桔抗肽 規(guī)格: 0.5mg PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide)
血管緊張素原(抗原) 規(guī)格: 0.5mg AT (Angiotenogen)
Panaxadiol 人參二醇 19666-76-3 20mg
Paclitaxel 紫杉醇 33069-62-4 20mg
Paeonol 丹皮酚 552-41-0 20mg
Oxyresveratrol 氧化白藜蘆醇 29700-22-9 20mg
β-n-Oxalylamino-l-alanine 三七素 5302-45-4 20mg
Oleanonic acid 齊墩果酮酸 17990-42-0 20mg
Ginsenoside Rg3 人參皂苷Rg3 14197-60-5 20mg
Berberrubine 小檗紅堿 15401-69-1 20mg
D-Mannose D-甘露糖 3458-28-4 100mg
(-)-Sparteine sulfate pentahydrate 五水合硫酸司巴丁 1556278 20mg