咨詢電話:18117197628
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
高爾基體蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
動物細胞/組織 |
2-8℃ |
BH-D85284 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
磷脂酰肌醇蛋白聚糖 3 48T/96T
倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗肝細胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
載脂蛋白A4 48T/96T
鴨子白介素12(IL-12)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠二磷酸腺苷(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人透明質(zhì)酸(HA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細胞分化抗原34 48T/96T
高爾基體蛋白提取試劑盒熒光素標記肌增強因子2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MEF2A/FITC
熒光素標記肌球蛋白磷酸酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Myosin Phosphatase/FITC
熒光素標記多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MRP5/ABCC5/FITC
熒光素標記NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Contactin-6/mNB-3/FITC
熒光素標記核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NF-κBp50/FITC
熒光素標記一氧化氮合成酶-2抗體(誘導型)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NOS-2/iNOS/FITC
熒光素標記p21抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-P21/WAF1/CIP1 /FITC
熒光素標記核小體結(jié)合蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NSBP1/FITC
熒光素標記纖溶酶原激活物抑制因子2抗體體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PAI-2/FITC
熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PDK1(phospho Y373 + Y376) /FITC
熒光素標記抗磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-PAK1/2/3(pThr423)/FITC
Cholic acid 膽酸 81-25-4 20mg
封口膜 4英寸×125英尺 4×125 卷
L-5-Hydroxytryptophan L-5-羥基色氨酸 895096 20mg
Mineraloil 礦物油(液體石蠟) 100ml 瓶
Carbazole 咔唑 25g 瓶
Heparin Sepharose 6FF 肝素-瓊脂糖凝膠 6FF 25mL 瓶
D-Mannitol D-甘露醇 250g 瓶
Naphthol Blue Black 氨基黑10B 5g 瓶
Ofloxacin 氧氟沙星 25g 瓶
ConA Type A IV 刀豆蛋白A IV 25mg 瓶