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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白提取試劑盒-非酶法 |
50T/100T |
WB,IP等 |
植物 |
2-8℃ |
BH-D85300 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
結(jié)蛋白 48T/96T
人抗胸腺細胞球蛋白(ATG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胰島素 48T/96T
人可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
粒細胞/單核細胞集落刺激因子 48T/96T
雞新城疫抗體(NDV-ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
神經(jīng)生長因子受體 48T/96T
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白提取試劑盒-非酶法熒光素標記兔抗蛋白裂解酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Matriptase/FITC
熒光素標記層粘連蛋白受體1抗體(C端)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MGr1-Ag/37LRP /FITC
熒光素標記基質(zhì)金屬蛋白酶-12/巨噬金屬彈力蛋白酶抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MMP-12/FITC
熒光素標記粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-mucin-1/Muc-1/CD227 /FITC
熒光素標記去氧腎上腺素抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Nephrin Protein/FITC
熒光素標記P物質(zhì)受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NK-1/Substance P Receptor /FITC
熒光素標記胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Oct-4/FITC
熒光素標記神經(jīng)肽Y1受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-NPY1R/FITC
熒光素標記磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-P53 (Ser15) /FITC
熒光素標記兔抗增值核抗原抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PCNA/FITC
熒光素標記磷酸化纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-P-fscn1/FITC
α-mangostin α-倒捻子素 1551491 20mg
Astaxanthin 蝦青素 472-61-7 20mg
Epmedin C 朝藿定C 110642-44-9 20mg
L-Malic acid L-蘋果酸 97-67-6 100mg
Imidacloprid 吡蟲啉 138261-41-3 100mg
一次性巴氏德吸管 3ml 包
超濾離心管 0.5ml-3KD 0.5ml 個
D-Glucurone D-葡萄糖醛酸內(nèi)酯 25g 瓶
TRIS 100g 瓶
Soy Isoflavones 大豆異黃酮80% 25g 瓶