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自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
固定細胞蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
動物細胞 |
2-8℃ |
BH-D85310 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
E選擇素 48T/96T
小鼠NOD樣受體-1(NOD-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白介素-12 p40 48T/96T
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胱硫醚β合成酶(CBS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人乙酰肝素酶(HPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
克拉拉細胞分泌蛋白 48T/96T
固定細胞蛋白提取試劑盒熒光素標記促腎上腺皮質(zhì)釋放因子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CRF/CRH /FITC
熒光素標記CXC趨化因子14抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CXCL14/FITC
熒光素標記多巴胺受體-D3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DRD3 receptor/FITC
熒光素標記結(jié)蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Desmin/FITC
膠體金離子標記大腸埃希桿O6抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-EPEC-O6/Gold
熒光素標記磷酸化eIF-4E(Ser209)抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-eIF4E(pSer209)/FITC
熒光素標記磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) /FITC
熒光素標記絲裂原活化蛋白激酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ERK1/ERK /FITC
熒光素標記兔抗FOSL1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-FOSL1/FITC
熒光素標記生長抑制DNA損傷基因153抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-GADD153/FITC
熒光素標記GDNF家族受體α-4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-GFRA4/FITC
Amphotericin B solubilized 可溶性兩性霉素B 100mg 支
Nutrient Broth (Dextrose-Free) 營養(yǎng)肉湯 250g 瓶
Tannase 單寧酶 1g 瓶
250 bp DNA Ladder 50T 支
兔抗HRP(血清) 5ml 支
BCIP 5-溴-4--3-吲哚基磷酸鹽 100mg 瓶
一次性針頭式濾器(50個/盒) 0.22um 個
Hoechst 33342-PI雙染試劑盒 500ml(T) 盒
Syringic acid 丁香酸 530-57-4 20mg
Mesaconitine 新堿 2752-64-9 20mg