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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
植物線粒體蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
植物 |
2-8℃ |
BH-D85318 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人球蛋白G4(IgG4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠環(huán)氧合酶2(COX-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
生長調(diào)節(jié)致癌基因Gamma 48T/96T
人尿微量白蛋白(ALB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胰島素樣蛋白5 48T/96T
犬腎上腺髓質素(ADM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
植物線粒體蛋白提取試劑盒人腺苷三磷酸結合盒轉運蛋白A1 規(guī)格: 48T ABCA1(human)
人內(nèi)因子 規(guī)格: 48T TH1/TH2
人腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格: 48T BDNF
人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格: 48T STM
大鼠α-干擾素 規(guī)格: 48T Humen IFN- Alpha
大鼠雌二醇 規(guī)格: 96T E2(Ret)
小鼠整合素連接激酶1 規(guī)格: 48T ILK-1(mouse)
大鼠瘦素 規(guī)格: 48T leptin
小鼠血管內(nèi)皮間粘附因子-1 規(guī)格: 48T VCAM-1
人原鈣黏素1 規(guī)格: 48T PCDH1( Human protocadherin 1,PCDH1 )ELISA Kit
人因子 規(guī)格: 48T Human lymphocyte factor ELISA Kit
Resveratrol 白藜蘆醇 5g 瓶
Disodium phosphate dodecahydrate 十二水合磷酸氫二鈉 500g 瓶
Tetrabutylammonium bromide 四丁基溴化銨 100g 瓶
Carvedilol 卡維地洛 1g 瓶
咖啡酸/3,4-二羥基肉桂酸 5g 瓶
L(+)-Lactic acid L(+)-乳酸 5g 瓶
Octyl -Sepharose 4FF 辛基-瓊脂糖凝膠 4FF 25mL 瓶
D(+)Glucose D-無水葡萄糖 500g 瓶
中性紅染色液(0.1% 規(guī)染色) 100ml 瓶
Oxacillin sodium 苯唑西林 5g 瓶