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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
植物高爾基體蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
WB,IP等 |
植物 |
2-8℃ |
BH-D85330 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人乙胺碘呋酮(AD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)Elisa 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β細(xì)胞素 48T/96T
大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
妊娠期特異性beta1糖蛋白9 48T/96T
大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鐵蛋白(FE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
植物高爾基體蛋白提取試劑盒熒光素標(biāo)記CD72抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD72/Ly-32/FITC
膠體金離子標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-TNF- Alpha /Gold
熒光素標(biāo)記磷酸化酪氨酸激酶A抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC
熒光素標(biāo)記非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-TNK1/FITC
生物素化CD14抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD14/Biotin
熒光素標(biāo)記WEE1蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-WEE1 protein/FITC
ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-ABCF1
熒光素標(biāo)記斑聯(lián)蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Zyxin/FITC
禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus)
磷酸化APS抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-APS(Ser598)
脂肪炎癥因子Apelin抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Apelin
Kanamycin ( 100mg/ml)卡那霉素 5ml 瓶
羊抗牛IgG 1mg 支
內(nèi)劑 100ml 瓶
AEC顯色試劑盒(20×) 1ml 盒
Trypan Blue 臺(tái)盼藍(lán) 5g 瓶
X-α-gal (X-a-gal)5-溴-4--3-吲哚-a-D-半乳糖苷 100mg 瓶
Resveratrol 白藜蘆醇 501-36-0 20mg
Isorhynchophylline 異鉤藤堿 1811243 20mg
Cycleanine 輪環(huán)藤堿 518-94-5 20mg
Artemisinine 素 63968-64-9 20mg