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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
細(xì)胞蛋白快速提取試劑盒 |
50T/100T |
離心柱,雙向電泳 |
動(dòng)物細(xì)胞 |
2-8℃ |
BH-D85348 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
叉頭蛋白O3 48T/96T
猴子基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
17羥孕酮 48T/96T
大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬潑尼松龍(Prednisolone)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2 48T/96T
人上皮特異性抗原(ESA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人***腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞蛋白快速提取試劑盒人落葉型天皰瘡抗體 規(guī)格: 48T PF(Human Pemphigus Foliaceus) ELISA Kit
人白色念珠 規(guī)格: 48T C.albicans(Human Candida Albicans) ELISA Kit
人丁型肝炎IgM 規(guī)格: 48T HDV IgM(Human Hepatitis D virus IgM) ELISA Kit
人8異前列腺素 規(guī)格: 48T 8-iso-PG(Human 8-iso prostaglandin) ELISA Kit
人雄烯二酮 規(guī)格: 48T ASD(Human Androstenedione) ELISA Kit
人維生素D結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T DBP(Human Vitamin D-binding protein) ELISA Kit
人骨成型蛋白7 規(guī)格: 48T BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit
人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1 規(guī)格: 48T ABCA1(Human ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit
人絲裂原活化蛋白激酶激酶6 規(guī)格: 48T MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體 規(guī)格: 48T PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit
人α2抗纖溶酶 規(guī)格: 48T Alpha2-AP(Human Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit
Arginine Sepharose 4B 精氨酸-瓊脂糖凝膠 25ml 瓶
番紅染色液(沙黃) 10ml 瓶
Pullulan 普魯蘭糖 25g 瓶
維生素
L-Lysine L-賴(lài)氨酸鹽酸鹽 25g 瓶
鮭魚(yú)精DNA 10mg/ml 1ml 支
去內(nèi)質(zhì)粒大量提取試劑盒 10T 盒
羊抗小鼠IgG-HRP 1ml 支
4×SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(PH=6.8) 100ml 瓶
鴨臟器組織分離液試劑盒 200ml/KIT 盒