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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產品簡介:
產品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
Protein A 抗體純化試劑盒 |
5 ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85490 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
肌肉**抑制素 48T/96T
大鼠25-羥基維生素D(25-OH Vitamin D)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
轉鐵蛋白受體 48T/96T
雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子端粒酶(TE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
嗜酸粒細胞趨化因子 48T/96T
小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬總蛋白(TPS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Protein A 抗體純化試劑盒熒光素標記鈣激活氯離子通道4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CLCA4/FITC
熒光素標記前列腺素氧化環(huán)化酶2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-COX-2/FITC
熒光素標記心肌特異性肌鈣蛋白T抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-cTnT/Troponin T/FITC
熒光素標記球蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Cygb/FITC
辣根過氧化物酶標記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DCP /HRP
熒光素標記抗鴨瘟病毒抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DPV/FITC
辣根過氧化物酶標記抗DH5α大腸桿體蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-E.coli DH-5 Alpha /HRP
熒光素標記外基質蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-ECM1/FITC
熒光素標記腸道病毒71型/手足口病病毒抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-EV71/FITC
熒光素標記磷酯酶Cβ3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-PLC beta 3/Phospholipase C beta 3/FITC
熒光素標記抗纖維母表面抗原抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-FSP/Spastin/FITC
小腸結腸炎耶爾森氏 現(xiàn)貨促銷
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普通肉湯培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250 用于金黃色葡萄球的增培養(yǎng) (SN、GB標準),也可用于**效果測定