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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
透析袋,截留分子量20KD;直徑22mm;壓平寬度34mm |
1卷,36M |
|
|
2-8℃ |
BH-D85536 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
大鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素原(aGT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
可溶性血管內皮生長因子受體1 48T/96T
小鼠促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
食欲素A 48T/96T
人α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白三烯E4(LTE4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肝生素激活物 48T/96T
小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人膠原酶I(Collagenase I)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
透析袋,截留分子量20KD;直徑22mm;壓平寬度34mm降鈣素受體(抗原) 規(guī)格: 0.5mg CT-R (Calcitonin receptor)
葡萄糖轉運蛋白4(抗原) 規(guī)格: 0.5mg GLUT4(Glucose transporter type 4)
規(guī)格: 0.5mg IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽)
Nogo-66 (1-40)多肽 規(guī)格: 0.5mg Nogo-66 1-40 peptide
蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位(抗原) 規(guī)格: 0.5mg PP-2B alpha 1
神經(jīng)生長因子的一種(抗原) 規(guī)格: 0.5mg TrK A.B.C
表皮生長因子受體3(抗原) 規(guī)格: 0.5mg ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3)
CD14/內受體抗原 規(guī)格: 0.5mg CD14(cluster of differentiation antigen 14)
畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)N端 規(guī)格: 0.5mg Cripto-1(N-Terminus)
轉錄因子E2F-6抗原 規(guī)格: 0.5mg E2F6
原纖維蛋白1抗原 規(guī)格: 0.5mg FBN1 (fibrillin 1)
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