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自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
封閉液 |
100ml/500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85564 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
旁分泌的方式分泌血小板源性生長因子受體β 48T/96T
人半乳甘露聚糖(GM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
內(nèi)皮素受體A 48T/96T
豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人內(nèi)(ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
粒細(xì)胞趨化蛋白-2 48T/96T
人凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
封閉液重組豬水腫素蛋白(因子O139) 規(guī)格: 0.2mg rSLT/SLT-IIe(O139)(Shiga-Like Toxin Type II Variant)
ABL1抗原 規(guī)格: 0.5mg ABL1(v-abl Abelson murine leukemia viral oncogene homolog 1)
色素 C(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Cytochrome C
胃泌素抑制肽(抗原) 規(guī)格: 0.5mg GIP (Gastric Inhibitory polypeptide)
整合素-β3(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3)
軸索過度生長抑制因子受體(多肽抗原) 規(guī)格: 0.5mg Nogo R
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原 規(guī)格: 0.5mg active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit)
孕受體(抗原) 規(guī)格: 0.5mg PR (Progestogerone receptor)
CD28抗原 規(guī)格: 0.5mg CD28
c-erbB-4癌基因抗原 規(guī)格: 0.5mg C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4)
畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關(guān)肽)C端 規(guī)格: 0.5mg Cripto-1(C-Terminus)
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