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自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
1×TBST(pH7.5,TBS溶液/Tween20) |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85594 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
小鼠肝炎病毒(MHV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β半乳糖苷酶 48T/96T
魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
補(bǔ)體因子I 48T/96T
人補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1×TBST(pH7.5,TBS溶液/Tween20)碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗原 規(guī)格: 0.5mg Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7)
視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗原 規(guī)格: 0.5mg Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2)
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3抗原 規(guī)格: 0.5mg VEGFR-3(Vascular Epidemal growth factor receptor-3)
間隙連接蛋白45(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Connexin-45(CX45)
抗組蛋白H3樣蛋白(C端抗原) 規(guī)格: 0.5mg histone H3-like protein
低分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原) 規(guī)格: 0.5mg NF-L(Neurofilament triplet L)
鏈霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白 規(guī)格: 2mg streptomycin/BSA
Smad 2/3(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Smad2(Mothers against decapentaplegic homolog 2)
人III型前膠原肽(N端) 規(guī)格: 48T PIIINP
人噬酸性粒趨化因子-2 規(guī)格: 48T Eotaxin-2 human
人巨噬炎性蛋白-3α 規(guī)格: 48T MIP-3 Alpha
酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250 用于食品中霉及酵母總數(shù)測(cè)定
Candida Elective 瓊脂 特價(jià)供應(yīng) 250 用于食品中Candida及酵母總數(shù)測(cè)定(Merck方法)
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