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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
5×非變性蛋白上樣緩沖液 |
5ml/ 10ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85600 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
補體片段C5a 48T/96T
白介素-17 48T/96T
小鼠促生長釋放(GHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬血管**素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乙型流感 48T/96T
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5×非變性蛋白上樣緩沖液大鼠絨毛膜促性腺 規(guī)格: 48T CG ELISA Kit
大鼠血管緊張素Ⅱ 規(guī)格: 48T ANG- II ELISA Kit
小鼠Qa抗原2 規(guī)格: 48T Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA Kit
小鼠白介素7 規(guī)格: 48T IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit
小鼠中性粒明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白 規(guī)格: 48T NGAL(Mouse neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit
小鼠干因子/肥大生長因子 規(guī)格: 48T SCF/MGF(Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit
小鼠髓磷脂堿性蛋白 規(guī)格: 48T MBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit
小鼠血紅素氧合酶2 規(guī)格: 48T HO-2(Mouse heme oxygenase 2) ELISA Kit
小鼠血管內(nèi)皮粘附分子1 規(guī)格: 48T VCAM-1/CD106(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶 規(guī)格: 48T BetaGD(Mouse Beta-glucuronidase) ELISA Kit
小鼠血清總補體 規(guī)格: 48T CH50(Mouse 50% complement hemolysis)ELISA Kit
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