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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
內(nèi)源性親和素封閉液 |
100ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85690 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠花生四烯酸(AA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人戊肝抗原(HEV-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人低分子肝素(LMWH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
趨化因子ip-10 48T/96T
白三烯C4 48T/96T
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿/山羊孕/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
內(nèi)源性親和素封閉液人趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒 Human fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 Human Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit
人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒 Human microtransferrinuria,MTF ELISA Kit
人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3(EAR3)ELISA試劑盒 Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3,EAR3 ELISA Kit
人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒 Human anti-OJ-antibody,OJ/IleRS ELISA Kit
小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1δ,MIP-1δ ELISA Kit
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒mouse follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒Rat free fatty acids,FFA ELISA Kit
大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA Kit
雞脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒Chicken Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒Goat P-Selectin/CD62P/GMP-140 ELISA Kit
植物蛋白胨肉湯 Vegetable Peptone Broth Oxoid500g
植物蛋白胨磷酸鹽肉湯 (VG0200) Oxoid
****大豆蛋白胨(GMO-Free Soya Peptone) Oxoid500g
Nutrient Agar Tablets 營(yíng)養(yǎng)瓊脂片劑 Oxoid100片
蛋白胨水Peptone Water Oxoid500g
Nutrient Agar 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 Oxoid500g
LAB-LEMCO( 牛肉膏) 肉湯 Lab-Lemco Broth Oxoid500g
麥康凱肉湯 (CM0005) Oxoid
麥康凱瓊脂 (CM0007) Oxoid
LAB-LEMCO( 牛肉膏) 瓊脂 Lab-Lemco Agar Oxoid500g