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技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:大豆熒光PCR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào):BH-P64473
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
Ai-phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC 熒光su標(biāo)記抗磷suan化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class aibodies: 0.2ml
Rabbit Ai-chicken IgG 兔抗雞IgG (親和層析純化)Multi-class aibodies: 1mg
生長(zhǎng)釋放因抗體 Ai-GHRF/GHRH 0.1ml
Goat Ai-Chicken IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
FADS1 英文名稱: 脂肪suan去飽和mei1抗體 0.2ml
Rhesus aibody Rh phospho-SLAMF1(Tyr281) 磷suan化信號(hào)細(xì)胞活化分子CD150抗體 0.1ml
Rabbit Ai-chicken IgG 兔抗雞IgG (親和層析純化)Multi-class aibodies: 1mg
P2P-R/RBBP6(proliferation poteial protein related) 增殖潛能相關(guān)蛋白抗原Multi-class aibodies: 0.5mg
Ai-Artemin Artemin抗體Multi-class aibodies: 0.2ml
Rhesus aibody Rh phospho-Arhgef2(Ser810) 磷suan化Rho鳥suan交換因子2抗體 0.1ml
TIMP-2 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Utrophin 英文名稱: 肌營(yíng)養(yǎng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
DHRS7C 英文名稱: 短鏈脫氫mei/還原mei家族7C抗體 0.2ml
Ai-Artemin Artemin抗體Multi-class aibodies: 0.2ml
5HT3D + 5HT3E Receptor 英文名稱: 5-羥色胺受體3D+3E抗體 0.2ml
EFR3A 英文名稱: EFR3A蛋白抗體 0.2ml
Toll樣受體2抗體 Ai-TLR2 0.1ml
Ai-TNFAIP3 /FITC 熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體IgGMulti-class aibodies: 0.2ml
Rhesus aibody Rh phospho-KCNC1(Ser503) 磷suan化離子通道蛋白Kv3.1抗體 0.1ml
PDGF-R-B 血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B(抗原)Multi-class aibodies: 0.5mg
大豆熒光PCR檢測(cè)試劑盒焦磷suan鈉(AR)suan交沙霉su全血線粒體DNA萃取試劑盒
碳suan氫銨(AR)醋suan麥迪霉su純化線粒體DNA萃取試劑盒
氯化銨(AR)依替米星/組織線粒體DNA萃取試劑盒
水楊suan(AR)巴龍霉su/組織基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒
甲殼su;幾丁質(zhì)乙酰吉它霉suDNA產(chǎn)物去鐵純化試劑盒
A4-差向環(huán)su果菜類食物DNA分離試劑盒
多效唑脫水環(huán)su稻麥類食物DNA分離試劑盒
suan鈉十水(AR)脫水差向環(huán)su乳品類食物DNA分離試劑盒