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技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:霍亂弧菌O1群熒光PCR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào):BH-P64479
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
Ai-P-fscn1/FITC 熒光su標(biāo)記磷suan化纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗體IgGMulti-class aibodies: 0.2ml
Mouse Ai-Goat IgM/Gold 金標(biāo)記鼠抗羊IgM (10nm/15nm)Multi-class aibodies: 2ml
植物延展su-β Ai-EXPB-2death inducer-obliterator-2 0.2ml
Rabbit Ai-Goat IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
phospho-FAK(Ser722) 英文名稱: 磷suan化粘著斑激mei抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh Phospho-TAK1(Thr184) 磷suan化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激mei1 0.1ml
Mouse Ai-Goat IgM/Gold 金標(biāo)記鼠抗羊IgM (10nm/15nm)Multi-class aibodies: 2ml
Cyclin C 周期su C(抗原)Multi-class aibodies: 0.5mg
Ai-CCR-2A 細(xì)胞表面趨化因子受體2A抗體Multi-class aibodies: 0.2ml
Rhesus aibody Rh PBR/DBI/TSPO 外周苯二氮受體抗體 0.1ml
CD7 Kit Human 人 CD7 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TTI1 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子相互作用蛋白1抗體 0.2ml
CTNNAL1 英文名稱: 粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體 0.1ml
Ai-CCR-2A 細(xì)胞表面趨化因子受體2A抗體Multi-class aibodies: 0.2ml
SLCO1C1 英文名稱: 溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1抗體 0.1ml
ELAVL1/HuR 英文名稱: ELAVL1抗體 0.2ml
血小板源性生長(zhǎng)因子-BB抗體 Ai-PDGF-BB 0.2ml
Ai-Fut4/CD15/SSEA-1 /FITC 熒光su標(biāo)記階段特異性胚胎表面抗原-1抗體IgGMulti-class aibodies: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷suan化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 0.2ml
GAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(抗原)Multi-class aibodies: 0.5mg
霍亂弧菌O1群熒光PCR檢測(cè)試劑盒孔雀綠2-苯乙酰組織總RNA純化試劑盒
聚乙二2000諾氟總RNA純化試劑盒
硫代氨基脲(AR)環(huán)植物總RNA純化試劑盒(低多糖/酚)
氯化亞鐵水(AR)洛美植物總RNA純化試劑盒(高多糖/酚)
烏來糖;氨suan乙酯依諾植物mRNA直接純化試劑盒
鉬suan/組織mRNA直接純化試劑盒
tongsuanmei左總RNA樣品mRNA選擇純化試劑盒
甲磺suan依普羅沙坦;依普沙坦氟羅胞漿RNA分離試劑盒