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技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:犬細(xì)小病毒熒光PCR檢測試劑盒
貨號(hào):BH-P64492
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
E.coli O6 (Escherichia coli O6) E.coli O6大腸桿菌菌體蛋白Multi-class aibodies: 0.5mg
吸引su抗體 Ai-ATRN 0.1ml
Rhesus aibody Rh Phospho-EGFR (Tyr1172) 磷suan化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
M199培養(yǎng)液 250ml 國產(chǎn)
ZNF323 英文名稱: 鋅指蛋白323抗體 0.1ml
DPPA2 英文名稱: 多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體 0.1ml
吸引su抗體 Ai-ATRN 0.1ml
ERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激mei抗原Multi-class aibodies: 0.5mg
精氨suan加壓su受體2抗體 Ai-AVPR2 0.1ml
Rhesus aibody Rh Phospho-EGFR (Tyr1101) 磷suan化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
1640培養(yǎng)液 250ml 國產(chǎn)
Z8 英文名稱: 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8蛋白抗體 0.2ml
DTNB 英文名稱: 肌Dystrobrevin β蛋白抗體 0.2ml
精氨suan加壓su受體2抗體 Ai-AVPR2 0.1ml
ZNF93 英文名稱: 鋅指蛋白93抗體 0.2ml
DNAH9 英文名稱: 軸絲動(dòng)力蛋白重鏈9抗體 0.2ml
β-抑制蛋白2抗體 Ai-β-arrestin 2 0.1ml
Ai-TRF/Gold 金離子標(biāo)記抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體IgGMulti-class aibodies: 0.5ml(15nm)
Rhesus aibody Rh phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷suan化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) Multi-class aibodies: 100ug
犬細(xì)小病毒熒光PCR檢測試劑盒水溶毛地黃皂L-谷氨酰人體p16基因甲基化檢測試劑盒
DSP還原型甘肽人體BRCA-1基因甲基化檢測試劑盒
乙二乙suan二鈉一鎂鹽胸腺嘧啶人體BRCA-2基因甲基化檢測試劑盒
谷氨suan脫氫mei人體E-Cadherin基因甲基化檢測試劑盒
對羥基苯三唑單磷suan阿糖腺人體Cyclin A1基因甲基化檢測試劑盒
亞氨基二乙suan(>98%,BR)生長抑su人體Stat1基因甲基化檢測試劑盒
二氧化鉛(>98%,BR)脫氧核糖胞嘧啶核suan鈉人體ras基因甲基化檢測試劑盒
DL-乳suan鋰(>98%,BR)脫氧核糖腺核suan鈉人體PR-A基因甲基化檢測試劑盒-現(xiàn)貨